ಫೋರ್ ಡೈರೆಕ್ಟ್ RT-qPCR ಕಿಟ್
ಕಿಟ್ ವಿವರಣೆ:
◮ಆರ್ಎನ್ಎ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಿಲ್ಲದೆ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಸಂಗ್ರಹಗಳಿಂದ ಆರ್ಎನ್ಎ ನೇರ ನೈಜ-ಸಮಯದ ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ.ಈ ಕಿಟ್ ಒಂದು ಗಂಟೆಯೊಳಗೆ qRT-PCR ಚಕ್ರಗಳನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣವು ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್, ಹಾಟ್-ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್, ಆರ್ನೇಸ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್‌ನ ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಮಿಶ್ರಣವಾಗಿದೆ.ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಬಫರ್ ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಬಫರ್ ಘಟಕಗಳು, Mg ಸೇರಿದಂತೆ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ2+, dUTP, ಮತ್ತು dNTP ಗಳು.
ವಿವರಣೆ
ಫೋರ್‌ಡೈರೆಕ್ಟ್ RT-qPCR ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಆರ್ಎನ್ಎ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಿಲ್ಲದೆ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಸಂಗ್ರಹಗಳಿಂದ ಆರ್ಎನ್ಎ ನೇರ ನೈಜ-ಸಮಯದ ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ.ಈ ಕಿಟ್ ಒಂದು ಗಂಟೆಯೊಳಗೆ qRT-PCR ಚಕ್ರಗಳನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣವು ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್, ಹಾಟ್-ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್, ಆರ್ನೇಸ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್‌ನ ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಮಿಶ್ರಣವಾಗಿದೆ.ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಬಫರ್ ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಬಫರ್ ಘಟಕಗಳು, Mg ಸೇರಿದಂತೆ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ2+, dUTP, ಮತ್ತು dNTP ಗಳು.
ವಿಶೇಷಣಗಳು
100ಟಿ
ಕಿಟ್ ಘಟಕಗಳು
| ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಬಿಡುಗಡೆ ಏಜೆಂಟ್ |
| ಆರ್ಎನ್ಎ ರಕ್ಷಕ |
| 2× RT-qPCR ಬಫರ್ |
| ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ (Taq&M-MLV) |
| ಸೂಚನೆಗಳು |
ಪಿಸಿಆರ್ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್
1. ಪಿಸಿಆರ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳನ್ನು ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದ ನಂತರ, ಅವುಗಳನ್ನು ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಉಪಕರಣದ ಮಾದರಿ ಟ್ಯಾಂಕ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ.
2. ಥರ್ಮಲ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್
| ಹಂತ | ತಾಪಮಾನ | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್‌ಗಳು | |
| 1 | ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನ | 50℃ | 15 ನಿಮಿಷಗಳು | 1 |
| 2 | ಪ್ರೀ-ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95℃ | 1 ನಿಮಿಷ | 1 |
| 3 | ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95℃ | 10 ಸೆಕೆಂಡುಗಳು | 42 |
| 4 | ಅನೆಲ್/ವಿಸ್ತರಣೆ | 60℃ | 30 ಸೆಕೆಂಡುಗಳು | |
ಸೂಚನೆ:ಪ್ರತಿ ಚಕ್ರದ ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಹಂತದ ನಂತರ ತಕ್ಷಣವೇ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಪತ್ತೆಯಾಗಿದೆ.
3. ಹೊಂದಿಸಿದ ನಂತರ, ಫೈಲ್ ಅನ್ನು ಉಳಿಸಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಅನ್ನು ರನ್ ಮಾಡಿ.
ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಹಂತಗಳು
ಕಾರಕವನ್ನು ತಯಾರಿಸುವ ಮೊದಲು, ಕಿಟ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಬೇಕು.
ಕಾರಕ ತಯಾರಿಕೆ
1. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ
| ಘಟಕ | ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿ ಅಥವಾ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕೆ ವಾಲ್ಯೂಮ್ |
| ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಬಿಡುಗಡೆ ಏಜೆಂಟ್ | 5μL |
| ಆರ್ಎನ್ಎ ರಕ್ಷಕ | 0.5 μL |
2. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ
| ಘಟಕ | ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿ ಅಥವಾ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕೆ ವಾಲ್ಯೂಮ್ |
| 2× RT-qPCR ಬಫರ್ | 15 μL |
| ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಬ್‌ಗಳು | 1μL |
ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ಶೆಲ್ಫ್ ಜೀವನ
-ಕಿಟ್ ಅನ್ನು -20 ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು± 5℃.ಮಾನ್ಯತೆಯ ಅವಧಿಯು 12 ತಿಂಗಳುಗಳು.
ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫ್ರೀಜ್-ಲೇಪ ಚಕ್ರಗಳನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ (<5 ಚಕ್ರಗಳು).
