Lnc-RT Heroᵀᴹ I(gDNase ಜೊತೆಗೆ)(lncRNA ಯಿಂದ ಮೊದಲ-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ cDNA ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಸೂಪರ್ ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್)
ವಿಶೇಷಣಗಳು
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase ಜೊತೆಗೆ) ಜೀನೋಮಿಕ್ DNA ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಲು lncRNA ಗಾಗಿ ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಆಗಿದೆ.5×gDNase ಮಿಕ್ಸ್ 2 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 42 ° C ನಲ್ಲಿ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯಲ್ಲಿ ಉಳಿದ ಜೀನೋಮ್ ಅನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದು, qPCR ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಮೇಲೆ ಜೀನೋಮ್‌ನ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪವನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ತಪ್ಪಿಸುತ್ತದೆ.
5×L-RT HeroTM ಮಿಕ್ಸ್ Foregene LncRNA ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಅನ್ನು ವಿಶೇಷವಾಗಿ Foregene ನಿಂದ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ lncRNA ಮತ್ತು ಇತರ ದೀರ್ಘ RNA ಸಂಕೀರ್ಣ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳಿಗಾಗಿ ಹೊಸ ರೀತಿಯ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಆಗಿದೆ, ಇದು ಬಲವಾದ RNA ಬಾಂಧವ್ಯ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ರಿವರ್ಸಲ್ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್ ದಕ್ಷತೆಯೊಂದಿಗೆ.ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಶನ್ ದರವನ್ನು ವೇಗವಾಗಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ GC ವಿಷಯ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣ ದ್ವಿತೀಯಕ ರಚನೆಯೊಂದಿಗೆ RNA ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ ಲಿಪ್ಯಂತರ ಮಾಡಬಹುದು.ಮೊದಲ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ cDNA ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು 15 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ 42 ° C ನಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಬಹುದು.
ಕಿಟ್ ಘಟಕಗಳು
| 5× ಜಿಡಿನೇಸ್ ಮಿಕ್ಸ್ |
| 5× L-RT HeroTM ಮಿಕ್ಸ್ |
| RNase-ಮುಕ್ತ ddH2O |
| ಸೂಚನೆಗಳು |
ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳು ಮತ್ತು ಅನುಕೂಲಗಳು
■2 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನಲ್ಲಿ gDNA ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದಾದ gDNA ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವ ಸಮರ್ಥ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ.
■ ಇದು lncRNA ಯ ಪ್ರತಿಲೇಖನವನ್ನು ಸಮರ್ಥವಾಗಿ ರಿವರ್ಸ್ ಮಾಡಬಹುದು.ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು qPCR ಗೆ ಒಳಪಡಿಸಿದಾಗ, Ct ಮೌಲ್ಯವು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್‌ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿರುತ್ತದೆ.
■ ದಕ್ಷ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್, ಮೊದಲ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ cDNA ಯ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಲು ಇದು ಕೇವಲ 15 ನಿಮಿಷಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.
■ ಸಂಕೀರ್ಣ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು: ಹೆಚ್ಚಿನ GC ವಿಷಯ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣ ದ್ವಿತೀಯಕ ರಚನೆಯೊಂದಿಗೆ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಸಹ ಹೆಚ್ಚಿನ ದಕ್ಷತೆಯೊಂದಿಗೆ ಹಿಂತಿರುಗಿಸಬಹುದು.
■ ಹೈ-ಸೆನ್ಸಿಟಿವಿಟಿ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್, pg-ಲೆವೆಲ್ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು ಸಹ ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ cDNA ಪಡೆಯಬಹುದು.
■ ಹಿಮ್ಮುಖ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಹೆಚ್ಚಿನ ಉಷ್ಣ ಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಸೂಕ್ತ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ತಾಪಮಾನವು 42 ಆಗಿದೆ℃, ಮತ್ತು ಇದು ಇನ್ನೂ 50 ನಲ್ಲಿ ಉತ್ತಮ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಶನ್ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ℃.
ಕಿಟ್ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್
lncRNA ಸಾಪೇಕ್ಷ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ.
lncRNA ಸಂಪೂರ್ಣ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ.
ಇದು ಆರ್ಎನ್ಎ ವೈರಸ್‌ನಂತಹ ಜಾಡಿನ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಮತ್ತು ನಿಖರವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತದೆ.
ಹೆಚ್ಚಿನ GC ವಿಷಯ ಅಥವಾ ಸಂಕೀರ್ಣ ದ್ವಿತೀಯ ರಚನೆಯೊಂದಿಗೆ RNA ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳ ಹಿಮ್ಮುಖ ಪ್ರತಿಲೇಖನ.
ಕೆಲಸದ ಹರಿವು
ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ಶೆಲ್ಫ್ ಜೀವನ
ಕಿಟ್ ಅನ್ನು -20 ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು°C. -20 ನಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರ ತಾಪಮಾನದ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್ನಲ್ಲಿ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ°ರಶೀದಿಯನ್ನು ತಕ್ಷಣವೇ ಸಿ.ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ಸೂಕ್ತವಾಗಿದ್ದರೆ, 1-ವರ್ಷದ ಮಾನ್ಯತೆಯ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಉತ್ಪನ್ನವು ಯಾವುದೇ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಕುಗ್ಗಿಸುವುದಿಲ್ಲ.
ಸಮಸ್ಯೆ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮಾರ್ಗದರ್ಶಿ
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವರ್ಧನೆ
1. ಅವಿವೇಕದ ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ
ಶಿಫಾರಸು: ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ ತತ್ವಗಳ ಪ್ರಕಾರ ವಿನ್ಯಾಸ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು.
2. ಜಿನೋಮ್ ಅವಶೇಷಗಳು.
ಸಲಹೆ: gDNA ತೆಗೆಯುವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮೊದಲ ಹಂತವು 42 ° C ಆಗಿದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಸಮಯವನ್ನು 5 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ವಿಸ್ತರಿಸಬಹುದು.
RT-qPCR ನಿಂದ ಯಾವುದೇ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಇಲ್ಲ
1. ಆರ್ಎನ್ಎ ಕ್ಷೀಣಿಸುತ್ತದೆ.
ಶಿಫಾರಸು: ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ವಸ್ತುವು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ತಾಜಾವಾಗಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ-ಗುಣಮಟ್ಟದ ಮತ್ತು ಉನ್ನತ-ಶುದ್ಧತೆಯ ಆರ್ಎನ್ಎ ಬಳಸಬೇಕು.
2. ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ.
ಶಿಫಾರಸು: ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಶನ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್‌ಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ SDS, ಗ್ವಾನಿಡಿನ್ ಲವಣಗಳು, EDTA, ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ. ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು RNA ಅವಕ್ಷೇಪವನ್ನು 70% ಎಥೆನಾಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ತೊಳೆಯಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
3. ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ ಸಮಸ್ಯೆಗಳು.
ಶಿಫಾರಸು: ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ ತತ್ವದ ಪ್ರಕಾರ, ತಪಾಸಣೆಗಾಗಿ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಮರುವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಿ.
ಗುರಿ ಬ್ಯಾಂಡ್ ಖಾಲಿ ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ
1. ಕಾರ್ಯಾಚರಣಾ ಉಪಕರಣಗಳು ಅಥವಾ ಕಾರಕಗಳ ಮಾಲಿನ್ಯ.
ಶಿಫಾರಸು: ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ ಎಲ್ಲಾ ಕಾರಕಗಳು ಅಥವಾ ಉಪಕರಣಗಳು ಆಟೋಕ್ಲೇವ್ ಆಗಿರಬೇಕು.ಡಿಎನ್ಎ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪೈಪೆಟ್‌ಗೆ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವುದನ್ನು ತಡೆಯಲು ಅಥವಾ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ನಿಂದ ಹೊರಗೆ ಚೆಲ್ಲುವುದನ್ನು ತಡೆಯಲು ನಿರ್ವಹಿಸುವಾಗ ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ಮತ್ತು ಸೌಮ್ಯವಾಗಿರಿ.
2. ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ತಯಾರಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮಾಲಿನ್ಯ ಸಂಭವಿಸಿದೆ.
ಶಿಫಾರಸು: ನಿರ್ವಹಿಸುವಾಗ ಅಗತ್ಯ ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ: ಲ್ಯಾಟೆಕ್ಸ್ ಕೈಗವಸುಗಳನ್ನು ಧರಿಸುವುದು, ಫಿಲ್ಟರ್ ಸುಳಿವುಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದು.ಮಾಲಿನ್ಯ-ನಿರೋಧಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ನೈಜ ಸಮಯದ PCR ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬಳಸಿ.
3. ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಕ್ಷೀಣಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ.
ಸಲಹೆ: SDS-PAGE ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಡಿಗ್ರೇಡ್ ಆಗಿವೆಯೇ ಎಂಬುದನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಮತ್ತು ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಪತ್ತೆ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗಾಗಿ ಹೊಸ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸಿ.
ಸೂಚನಾ ಕೈಪಿಡಿ:
-
ಮೌಸ್ ಟೈಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಕಿಟ್ ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಲೈಸಿಸ್ ರೀಗ್...
-
ಪ್ಲಾಂಟ್ ಲೀಫ್ ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಜೊತೆಗೆ ಕಿಟ್-ಯುಎನ್‌ಜಿ (ಸ್ಯಾಮ್ ಇಲ್ಲದೆ...
-
ಮೌಸ್ ಟೈಲ್ ಸೂಪರ್ ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಕಿಟ್ ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಲೈಸಿಸ್...
-
ಬ್ಲಡ್ ಸೂಪರ್ ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಕಿಟ್(ಯುಎನ್‌ಜಿ)-ಇಡಿಟಿಎ ಬ್ಲಡ್ ಡಿರ್...
-
ಫೊರೆಸಿ ಎಚ್ಎಸ್ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್
-
ERG1/TERT ಡ್ಯುಯಲ್ ಕಲರ್ ಪ್ರೋಬ್
