-
PCR, RT-PCR, qPCR ಮತ್ತು RT-qPCR ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು ಯಾವುವು
ಪಿಸಿಆರ್ ಒಂದು ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದ ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನಿಂದ ಡಿಎನ್ಎ ವರ್ಧಿಸಲು ಬಳಸುವ ಒಂದು ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ.ಆರ್ಎನ್ಎ ಮೂಲದಿಂದ ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಆರ್‌ಟಿ-ಪಿಸಿಆರ್ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಶನ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಅದನ್ನು ವರ್ಧಿಸಬಹುದು.PCR ಮತ್ತು RT-PCR ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿ ಅಂತ್ಯಬಿಂದು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಾಗಿವೆ, ಆದರೆ qPCR ಮತ್ತು RT-qPCR ಉತ್ಪನ್ನ ಸಿಂಟ್ ದರದ ಚಲನಶಾಸ್ತ್ರವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತವೆ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
ಡ್ರಗ್ ಡಿಸ್ಕವರಿ ಮುಂಚೂಣಿಯಲ್ಲಿ: ಸಣ್ಣ ಅಣುಗಳೊಂದಿಗೆ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸುವುದು
ಕೋವಿಡ್‌ಗಾಗಿ ಫಿಜರ್‌ನ ಎಮ್‌ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಲಸಿಕೆಯು ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ (ಆರ್ಎನ್ಎ) ಅನ್ನು ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಗುರಿಯಾಗಿ ಬಳಸುವ ಉತ್ಸಾಹವನ್ನು ಪುನರುಜ್ಜೀವನಗೊಳಿಸಿದೆ.ಆದಾಗ್ಯೂ, ಸಣ್ಣ ಅಣುಗಳೊಂದಿಗೆ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸುವುದು ಅತ್ಯಂತ ಸವಾಲಿನ ಸಂಗತಿಯಾಗಿದೆ.ಆರ್ಎನ್ಎ ಕೇವಲ ನಾಲ್ಕು ಬಿಲ್ಡಿಂಗ್ ಬ್ಲಾಕ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ: ಅಡೆನಿನ್ (ಎ), ಸೈಟೋಸಿನ್ (ಸಿ), ಗ್ವಾನಿನ್ (ಜಿ), ಮತ್ತು ಯುರಾಸಿಲ್ (ಯು) ಇದು ಥೈಮಿನ್ ಅನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ.ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಡ್ರಗ್ಸ್ ಎಂದರೇನು?
"ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಡ್ರಗ್ಸ್" "ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್" ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ, ಇದು ಡಿಎನ್ಎ ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎಯಂತಹ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಆನುವಂಶಿಕ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ.ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಕಡಿಮೆ ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕದ ಔಷಧಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯ ಔಷಧಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಗುರಿಪಡಿಸಲಾಗದ mRNA ಮತ್ತು miRNA ಯಂತಹ ಅಣುಗಳ ಗುರಿಯನ್ನು ಇವುಗಳು ಅನುಮತಿಸುತ್ತವೆ, ಮತ್ತು ಒಂದು g...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
RT-PCR ನಲ್ಲಿ siRNA ಬಗ್ಗೆ ಕೆಲವು ಅನುಭವ
1. ಮೂಲಭೂತ ಜ್ಞಾನ (ನೀವು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಭಾಗವನ್ನು ನೋಡಲು ಬಯಸಿದರೆ, ದಯವಿಟ್ಟು ನೇರವಾಗಿ ಎರಡನೇ ಭಾಗಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ) ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ PCR ನ ವ್ಯುತ್ಪನ್ನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ, ನೈಜ-ಸಮಯದ PCR ಮುಖ್ಯವಾಗಿ PCR ವರ್ಧನೆಯ ಪ್ರತಿ ಚಕ್ರದಲ್ಲಿ ವರ್ಧನೆಯ ಉತ್ಪನ್ನದ ಪ್ರಮಾಣದ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ನೈಜ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
RT-PCR ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಆಪ್ಟಿಮೈಸೇಶನ್ ವಿಧಾನದ ವಿವರವಾದ ಸಾರಾಂಶ
一、ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ: 1. ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿ: ಯಶಸ್ವಿ ಸಿಡಿಎನ್‌ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯಿಂದ ಬರುತ್ತದೆ.ಉತ್ತಮ-ಗುಣಮಟ್ಟದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಕನಿಷ್ಠ ಪೂರ್ಣ-ಉದ್ದವಾಗಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ಇಡಿಟಿಎ ಅಥವಾ ಎಸ್‌ಡಿಎಸ್‌ನಂತಹ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್‌ಗಳಿಂದ ಮುಕ್ತವಾಗಿರಬೇಕು.ಆರ್ಎನ್ಎ ಗುಣಮಟ್ಟವು ಗರಿಷ್ಠವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತದೆ ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ವಿವರಗಳನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಿ
ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸದ ಆಧಾರ (99% ಸಮಸ್ಯೆಗಳನ್ನು ಪರಿಹರಿಸಬಹುದು) 1. ಪ್ರೈಮರ್ ಉದ್ದ: ಪಠ್ಯಪುಸ್ತಕಕ್ಕೆ 15-30bp ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸುಮಾರು 20bp.ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ನಿಜವಾದ ಸ್ಥಿತಿಯು 18-24bp ಆಗಿರುವುದು ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಮುಂದೆ ಉತ್ತಮವಾದ, ತುಂಬಾ ಉದ್ದವಾದ ಪ್ರೈಮರ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.2. ಪ್ರೈಮ್...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
qRT-PCR ಗಾಗಿ ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳನ್ನು ಹಿರಿಯ ವೈದ್ಯರು ಶ್ರಮದಾಯಕವಾಗಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದ್ದಾರೆ
ಪ್ರತಿಯೊಬ್ಬರೂ qRT-PCR ಪ್ರಯೋಗದ ತತ್ವ, ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ, ಫಲಿತಾಂಶದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ, ಇತ್ಯಾದಿಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಮಾತನಾಡುತ್ತಿದ್ದಾರೆ, ಆದರೆ qRT-PCR ನ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು ನಾನು ನಿಮ್ಮೊಂದಿಗೆ ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳಬೇಕೆಂದು ನಾನು ಭಾವಿಸುತ್ತೇನೆ.ಇದು ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಇದು ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಬಗ್ಗೆ.qRT-PCR ಮಾಡುವ ಮೊದಲು, ನಾವು ನಮ್ಮ ಬಗ್ಗೆ ಸ್ಪಷ್ಟವಾದ ತಿಳುವಳಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರಬೇಕು ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
RT-qPCR ಗಾಗಿ ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳು
RT-qPCR ಪ್ರಯೋಗವು RNA ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಗುಣಮಟ್ಟದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ, ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಮತ್ತು qPCR ಮೂರು ಹಂತಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ, ಪ್ರತಿ ಹಂತವು ಸಾಕಷ್ಟು ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ನಾವು ಕೆಳಗೆ ವಿವರವಾಗಿ ಪರಿಚಯಿಸುತ್ತೇವೆ.Ⅰ.ಆರ್ಎನ್ಎ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ RT-qPCR ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ, RNA ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡ ನಂತರ, ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
ನೈಜ ಸಮಯದ PCR ಗೆ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪರಿಚಯ
1. ಆರಂಭಿಕ ತಿಳುವಳಿಕೆ ಈ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ನಮ್ಮ ಹಿರಿಯರ ಮುಂದೆ ತಪ್ಪುಗಳನ್ನು ಮಾಡುವುದನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ನಾವು ಕೆಲವು ಪರಿಕಲ್ಪನೆಗಳು ಮತ್ತು ಪರಿಭಾಷೆಯನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಬೇಕು, ಉದಾಹರಣೆಗೆ: ಪ್ರ: RT-PCR, qPCR, ನೈಜ-ಸಮಯದ PCR ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸವೇನು, ಮತ್ತು ನೈಜ-ಸಮಯದ RT-PCR?ಉತ್ತರ: ಆರ್‌ಟಿ-ಪಿಸಿಆರ್ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಆಗಿದೆ (ರಿವರ್ಸ್ ಟಿ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
ಪಿಸಿಆರ್, ಮಲ್ಟಿಪಲ್ ಪಿಸಿಆರ್, ಇನ್ ಸಿಟು ಪಿಸಿಆರ್, ರಿವರ್ಸ್ ಪಿಸಿಆರ್, ಆರ್‌ಟಿ-ಪಿಸಿಆರ್, ಕ್ಯೂಪಿಸಿಆರ್ (1)– ಪಿಸಿಆರ್
ಪಿಸಿಆರ್, ಮಲ್ಟಿಪಲ್ ಪಿಸಿಆರ್, ಇನ್ ಸಿಟು ಪಿಸಿಆರ್, ರಿವರ್ಸ್ ಪಿಸಿಆರ್, ಆರ್‌ಟಿ-ಪಿಸಿಆರ್, ಕ್ಯೂಪಿಸಿಆರ್ (1)– ಪಿಸಿಆರ್ ನಾವು ವಿವಿಧ ಪಿಸಿಆರ್ Ⅰ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಗಳು, ಹಂತಗಳು ಮತ್ತು ವಿವರಗಳನ್ನು ವಿಂಗಡಿಸುತ್ತೇವೆ.ಪಿಸಿಆರ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್, ಇದನ್ನು ಪಿಸಿಆರ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಡಿಎನ್ಎ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಹಿಗ್ಗಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುವ ಆಣ್ವಿಕ ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವಾಗಿದೆ.ಇದನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಬಹುದು ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
qRT-PCR ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ತತ್ವ
RT-qPCR ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯ PCR ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಿಂದ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.ಇದು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗೆ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ರಾಸಾಯನಿಕಗಳನ್ನು (ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಡೈಗಳು ಅಥವಾ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಬ್ಸ್) ಸೇರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಅನೆಲಿಂಗ್ ಮತ್ತು ವಿಸ್ತರಣಾ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಅವುಗಳ ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರಕಾಶಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಪ್ರಕಾರ ನೈಜ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಸಿಗ್ನಾ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು -
RT-PCR ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಆಪ್ಟಿಮೈಸೇಶನ್ ವಿಧಾನದ ವಿವರವಾದ ಸಾರಾಂಶ
Ⅰ.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ: 1. ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಉನ್ನತ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಆರ್ಎನ್ಎ: ಯಶಸ್ವಿ ಸಿಡಿಎನ್‌ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯಿಂದ ಬರುತ್ತದೆ.ಉತ್ತಮ-ಗುಣಮಟ್ಟದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯು ಕನಿಷ್ಟ ಒಟ್ಟು ದೀರ್ಘಾವಧಿಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಬೇಕು ಮತ್ತು EDTA ಅಥವಾ SDS ನಂತಹ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರದ ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ.ಕ್ವಾಲಿ...ಮತ್ತಷ್ಟು ಓದು
-
ದೂರವಾಣಿ
-
ಇಮೇಲ್
-
Whatsapp
whatsapp
-
ಟಾಪ್