W:ಸಹೋದರ, ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಶನ್ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡಿದೆ, ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಕೊನೆಯ ಹಂತ - ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR!ಹೇ, ಸಹೋದರ, ನೈಜ-ಸಮಯದ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಎಂದರೇನು?
ಎಂ:ಪಿಸಿಆರ್ ನಿಮಗೆ ಯಾವಾಗಲೂ ತಿಳಿದಿರುತ್ತದೆ, ಸರಿ?
W:ನಿಮಗೆ ಗೊತ್ತಾ, ಪಿಸಿಆರ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಆಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಇದು ಡಿಎನ್‌ಎ ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವಾಗಿದೆ!
M:ಇದು ಬಹುತೇಕ... ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ಮೂಲಕ ಗುರಿಯ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಒಂದು ಮಿಲಿಯನ್‌ಗಿಂತಲೂ ಹೆಚ್ಚು ಬಾರಿ ವರ್ಧಿಸಲು ಇದು ತಾಂತ್ರಿಕ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಇದು ಗುರಿ ಅನುಕ್ರಮದ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಅಥವಾ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಮಾತ್ರ ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆರಂಭಿಕ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ.ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಪರಿಹರಿಸಲು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ತಾಂತ್ರಿಕ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ.ನೈಜ ಸಮಯದ PCR ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣ PCR (qPCR) ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಇದನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸುತ್ತದೆ.
W:ಸಾಮಾನ್ಯ PCR ನಿಂದ ವ್ಯತ್ಯಾಸವು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣದಲ್ಲಿದೆ?
ಎಂ:ಹೌದು, ಅಂದರೆ, ಪ್ರತಿ ಪಿಸಿಆರ್ ಚಕ್ರದ ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತದ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಿಗ್ನಲ್ ತೀವ್ರತೆಯ ಬದಲಾವಣೆಯ ಪ್ರಕಾರ ಆರಂಭಿಕ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮೊತ್ತವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಬಹುದು.
W: ಇದು ತುಂಬಾ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿದೆ!ಇದನ್ನು ನಾನೇ ಲೆಕ್ಕ ಹಾಕಬೇಕೇ?
ಎಂ:ಇದಕ್ಕೆ ನೀವು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಕಲಿಯುವ ಅಗತ್ಯವಿದೆ, ತತ್ವವನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ.ಈಗ ನೀವು ಮೊದಲು CT ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಬಹುದು, ಇದು ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಅರ್ಥಗರ್ಭಿತ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಡೇಟಾ, ಮತ್ತು ಅದರ ಗಾತ್ರವು ಆರಂಭಿಕ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮೊತ್ತದ ಗಾತ್ರಕ್ಕೆ ಅನುರೂಪವಾಗಿದೆ.ವರ್ಧನೆ ವಕ್ರಾಕೃತಿಗಳು ಮತ್ತು ಕರಗುವ ವಕ್ರರೇಖೆಗಳಂತಹ ಗ್ರಾಫ್‌ಗಳು ಸಹ ಇವೆ.ನಿಮ್ಮ ಪ್ರಯೋಗ ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿದೆಯೇ ಅಥವಾ ಇಲ್ಲವೇ ಎಂಬುದರ ಕುರಿತು ಅವರು ಅಂತಿಮ ಹೇಳಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತಾರೆ.
W: ಓಹ್, ಸಹೋದರ.ನಂತರ ನಾನು qPCR ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಮಾಡಲಿದ್ದೇನೆ!
ಎಂ:ಕಾರಕ ಪ್ರದೇಶಕ್ಕೆ ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸದಿರಲು ವಿಶೇಷ ಗಮನ ಕೊಡಿ, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ನಿಮ್ಮ ಬಳಕೆಯಾಗದ ಮಿಶ್ರಣವು ಸುಲಭವಾಗಿ ಕಲುಷಿತಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ!
W: ಅರ್ಥವಾಯಿತು!

ರಿಯಲ್ ಟೈಮ್ PCR Easyᴹ-SYBR ಗ್ರೀನ್ ಐ ಕಿಟ್

ಹೆಚ್ಚಿನ ದಕ್ಷತೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ
ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆ, ಉತ್ತಮ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ