ಹಾಟ್-ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಸಾಮಾನ್ಯ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಹಾಟ್-ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವವು ಕೆಲವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್ ಡೈಮರ್‌ಗಳ ರಚನೆಯನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ತಪ್ಪಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಗುರಿ ಜೀನ್ ವರ್ಧನೆಯ ಯಶಸ್ಸಿನ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ.ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಆನುವಂಶಿಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ, ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಉದ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಕಡ್ಡಾಯ ಮಾನದಂಡವೆಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬಾರದು.ಮೇಲಿನಿಂದ ನೋಡಬಹುದಾದಂತೆ, ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಪ್ರಸ್ತುತ, ದೇಶೀಯ ಮಾರುಕಟ್ಟೆಯಲ್ಲಿ ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವಗಳ ಅನೇಕ ಬ್ರ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳಿವೆ, ಆದರೆ ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವಗಳಿಲ್ಲ.ಹಲವಾರು ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ Taq ಕಿಣ್ವ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ಎದುರಿಸುತ್ತಿರುವ ನಾವು ಹೇಗೆ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕು?

1. ಹೆಚ್ಚಿನ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯೊಂದಿಗೆ ಹಾಟ್-ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ

ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯು ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವದ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಗೆ ನಿಕಟ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ.ಉತ್ತಮ Taq ಕಿಣ್ವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಹೊಂದುವಂತೆ ಮಾಡಿದ ನಂತರ, ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯು 95% ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆರಂಭಿಕ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮೊತ್ತದ ವರ್ಧನೆಯ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯು ವಿಸ್ತಾರವಾಗಿದೆ.ಗುರಿಯ ಜೀನ್ ಅಂಶವು ಕಡಿಮೆಯಾದಾಗ ತೃಪ್ತಿಕರ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಬಹುದು ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಪ್ರಮಾಣವು ಅಧಿಕವಾಗಿರುವಾಗ ವಿಷಪೂರಿತವಾಗುವುದು ಸುಲಭವಲ್ಲ ಮತ್ತು ಘಾತೀಯ ವರ್ಧನೆಯ ಅವಧಿಯು ದೀರ್ಘವಾಗಿರುತ್ತದೆ.ಕಳಪೆ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ Taq ಕಿಣ್ವಕ್ಕಾಗಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಹಲವು ಬಾರಿ ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ ಮಾಡಿದ್ದರೂ ಸಹ, ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯು ಇನ್ನೂ 90% ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿರುತ್ತದೆ, ವರ್ಧನೆಯ ಕರ್ವ್ನ "S" ಆಕಾರವು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿಲ್ಲ, ಇಳಿಜಾರು ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ವಕ್ರರೇಖೆಯು ಸಮತಟ್ಟಾಗಿದೆ.ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನ ಪ್ರಮಾಣವು ಕಡಿಮೆಯಾದಾಗ, ಅದನ್ನು ವರ್ಧಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನ ಪ್ರಮಾಣವು ಅಧಿಕವಾಗಿರುವಾಗ, ವರ್ಧನೆಯ ಪರಿಣಾಮವು ಸೂಕ್ತವಲ್ಲ.ಆದ್ದರಿಂದ, ಹೆಚ್ಚಿನ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯೊಂದಿಗೆ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಳ ಆಯ್ಕೆಯು PCR ಮತ್ತು qPCR ನ ಯಶಸ್ಸಿಗೆ ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ.

2. ಬಲವಾದ ಕಿಣ್ವ ಶಕ್ತಿಯೊಂದಿಗೆ ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ

ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವದ ಕಿಣ್ವಕ ಶಕ್ತಿಯು ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ.ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವದ ಕಿಣ್ವಕ ಶಕ್ತಿಯು ಪ್ರಬಲವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆಯ ಘಾತೀಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಅವಧಿಯು ದೀರ್ಘವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಹೆಚ್ಚು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ 'ಎಸ್-ಆಕಾರದ' ಕರ್ವ್, ಹೆಚ್ಚಿನ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಮೌಲ್ಯ ಮತ್ತು ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಪತ್ತೆಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.ದುರ್ಬಲ ಎಂಜೈಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಶಕ್ತಿಯೊಂದಿಗೆ ಬ್ರ್ಯಾಂಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 2-ಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಮಾತ್ರ ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತವೆ.3-ಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಮಾಡುವಾಗ, ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಕರ್ವ್ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ, ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತದ ಮೌಲ್ಯವು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಯಾವುದೇ ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ವರ್ಧನೆ ಕರ್ವ್ ಇಲ್ಲ, ಆದ್ದರಿಂದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸುವುದು ಕಷ್ಟ.

3. ಹೆಚ್ಚಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯೊಂದಿಗೆ ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ

ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಹೆಚ್ಚಿನ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಆದರೆ ಅಸಂಗತತೆಗಳೂ ಇವೆ.ವರ್ಧಿಸಬೇಕಾದ ಮಾದರಿಯ ಗುರಿಯ ವಂಶವಾಹಿ ಸಮೃದ್ಧಿಯು ಕಡಿಮೆಯಿದ್ದರೆ, Taq ಕಿಣ್ವದ ವರ್ಧನೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಜೀನ್ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ತುಣುಕಿನ 10-ಪಟ್ಟು ಅಥವಾ 5-ಪಟ್ಟು ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಕೈಗೊಳ್ಳುವುದು, ಕಡಿಮೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಪಿಸಿಆರ್ ಪತ್ತೆಯನ್ನು ಕೈಗೊಳ್ಳುವುದು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪತ್ತೆ ಸಂವೇದನೆಯೊಂದಿಗೆ ಬಿಸಿ-ಪ್ರಾರಂಭದ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವುದು ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯ ಪತ್ತೆ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ.

ಸಂಶೋಧಕರು ತಮ್ಮದೇ ಆದ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳು ಮತ್ತು ನಿಧಿಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ಮೇಲಿನಿಂದ ನೋಡಬಹುದಾಗಿದೆ.ಹಾಟ್-ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟಾಕ್ ಕಿಣ್ವದ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಡೈಲ್ಯೂಷನ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಮಾಡುವುದು ಉತ್ತಮ.

Foregene ನ ಉದಾಹರಣೆ's Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್:

ಫೊರೆಸಿ ಎಚ್ಎಸ್ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್

ವಿವರಣೆ

ಫೊರೆಸಿ ಎಚ್ಎಸ್ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಎನ್ನುವುದು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಆಗಿದ್ದು, ಜೀನ್ ರಿಕಾಂಬಿನೇಶನ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಿಂದ ಎಸ್ಚೆರಿಚಿಯಾ ಕೋಲಿ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದಲ್ಲಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.ಕಿಣ್ವವನ್ನು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ನಿರೋಧಕ ಮತ್ತು ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುವಂತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪತ್ತೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಮಾದರಿ ಲೈಸೇಟ್ (ಫೋರ್ಜೀನ್ ಲೈಸಿಸ್ ಸಿಸ್ಟಮ್) ಅನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಆಗಿ ಬಳಸಬಹುದು.

ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್

ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸದ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳ ಗುಣಾತ್ಮಕ PCR ಮತ್ತು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಪತ್ತೆ.

ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ

1.ಯಾವುದೇ ಬಾಹ್ಯ ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ ಪತ್ತೆಯಾಗಿಲ್ಲ

2. ಹೋಸ್ಟ್ ಇಲ್ಲದೆ ಉಳಿದಿರುವ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಪಿಸಿಆರ್ ವಿಧಾನ

3.ಇದು ಮಾನವ ಜೀನೋಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಏಕ-ನಕಲು ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ

4.ಒಂದು ವಾರದವರೆಗೆ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ, ಸ್ಪಷ್ಟ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳು

ಉತ್ಪನ್ನ ವಿವರಗಳು: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/