• ಫೇಸ್ಬುಕ್
  • ಲಿಂಕ್ಡ್ಇನ್
  • YouTube

1. ಆರ್ಎನ್ಎ ದ್ರಾವಣದ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆ ಮಾಡಿ

280, 320, 230, ಮತ್ತು 260 nm ನಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯು ಕ್ರಮವಾಗಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ, ಹಿನ್ನೆಲೆ (ಪರಿಹಾರ ಪ್ರಕ್ಷುಬ್ಧತೆ), ಉಪ್ಪಿನ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನಂತಹ ಸಾವಯವ ಪದಾರ್ಥಗಳ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ.ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ OD260/OD280 (ಅನುಪಾತ, R) ಅನ್ನು ಮಾತ್ರ ನೋಡಿ.1.8~2.0 ಆಗಿರುವಾಗ, ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯಲ್ಲಿನ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಥವಾ ಇತರ ಸಾವಯವ ವಸ್ತುಗಳ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ಸಹಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ಭಾವಿಸುತ್ತೇವೆ, ಆದರೆ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಟ್ರಿಸ್ ಅನ್ನು ಬಫರ್‌ನಂತೆ ಬಳಸಿದಾಗ, R ಮೌಲ್ಯವು 2 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿರಬಹುದು (ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಅದು <2.2 ಆಗಿರಬೇಕು) ಎಂದು ಗಮನಿಸಬೇಕು.R<1.8 ಆಗಿದ್ದರೆ, ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಥವಾ ಇತರ ಸಾವಯವ ಪದಾರ್ಥಗಳ ಮಾಲಿನ್ಯವು ಹೆಚ್ಚು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅಗತ್ಯಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ RNA ಯ ಭವಿಷ್ಯವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಬಹುದು.R>2.2 ಆಗಿದ್ದರೆ, ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಏಕ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲವಾಗಿ ಹೈಡ್ರೊಲೈಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಎಂದರ್ಥ.
 
2.ಆರ್ಎನ್ಎಯ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಟಿಕ್ ಮಾದರಿ
ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಡಿನಾಟರಿಂಗ್ ಜೆಲ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಇದು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯ ಗುಣಮಟ್ಟವನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಮಾತ್ರವಾಗಿದ್ದರೆ, ಡಿನಾಟರಿಂಗ್ ಜೆಲ್ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು.ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ನ ಉದ್ದೇಶವು 28S ಮತ್ತು 18S ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳ ಸಮಗ್ರತೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಅನುಪಾತ ಅಥವಾ mRNA ಸ್ಮೀಯರ್‌ನ ಸಮಗ್ರತೆಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯುವುದು.ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, 28S ಮತ್ತು 18S ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ಪ್ರಕಾಶಮಾನವಾದ, ಸ್ಪಷ್ಟ ಮತ್ತು ತೀಕ್ಷ್ಣವಾಗಿದ್ದರೆ (ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳ ಅಂಚುಗಳನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸುವುದು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿದೆ), ಮತ್ತು 28S ನ ಹೊಳಪು 18S ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಿಂತ ಎರಡು ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚು, ನಾವು RNA ಯ ಗುಣಮಟ್ಟವನ್ನು ಉತ್ತಮವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸುತ್ತೇವೆ.
ಮೇಲಿನವು ನಾವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಎರಡು ವಿಧಾನಗಳಾಗಿವೆ, ಆದರೆ ಈ ಎರಡೂ ವಿಧಾನಗಳು RNA ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವ RNase ಇದೆಯೇ ಎಂದು ನಮಗೆ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ.ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದ RNase ಇದ್ದರೆ, ಮೇಲಿನ ವಿಧಾನದಿಂದ ಅದನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ನಮಗೆ ಕಷ್ಟವಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ನಂತರದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಎಂಜೈಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು 37 ಡಿಗ್ರಿಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಕಾಲದವರೆಗೆ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಈ ರೀತಿಯಾಗಿ, ಆರ್ಎನ್ಎ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದ ಆರ್ನೇಸ್ ಇದ್ದರೆ, ನಂತರದ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ತಮ್ಮ ಪಾತ್ರವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಅತ್ಯಂತ ಸೂಕ್ತವಾದ ವಾತಾವರಣ ಮತ್ತು ಸಮಯವಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಈ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪ್ರಯೋಗವು ತಣ್ಣಗಾಗುತ್ತದೆ.ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವ ಆರ್‌ನೇಸ್ ಇದೆಯೇ ಎಂಬುದನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸುವ ವಿಧಾನವನ್ನು ನಾವು ಕೆಳಗೆ ಪರಿಚಯಿಸುತ್ತೇವೆ.
 
3. ಶಾಖ ಸಂರಕ್ಷಣೆ ಪರೀಕ್ಷೆ
ಮಾದರಿಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಪ್ರಕಾರ, ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ದ್ರಾವಣದಿಂದ ಎರಡು 1000 ಎನ್‌ಜಿ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಎಳೆಯಿರಿ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು 0.5 ಮಿಲಿ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಿ, ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಪಿಹೆಚ್ 7.0 ಟ್ರಿಸ್ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಒಟ್ಟು 10 ಯುಲ್ ಪರಿಮಾಣಕ್ಕೆ ಪೂರಕಗೊಳಿಸಿ, ತದನಂತರ ಟ್ಯೂಬ್‌ನ ಕ್ಯಾಪ್ ಅನ್ನು ಸೀಲ್ ಮಾಡಿ.ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದನ್ನು 70 ° C ನಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರ ತಾಪಮಾನದ ನೀರಿನ ಸ್ನಾನದಲ್ಲಿ ಹಾಕಿ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು 1 ಗಂ ಬೆಚ್ಚಗೆ ಇರಿಸಿ.ಇತರ ಭಾಗವನ್ನು -20 ° C ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್ನಲ್ಲಿ 1 ಗಂಟೆಯವರೆಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ.ಸಮಯ ಮುಗಿದ ನಂತರ, ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ಗಾಗಿ ಎರಡು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ.ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡ ನಂತರ, ಎರಡರ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಟಿಕ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳನ್ನು ಹೋಲಿಕೆ ಮಾಡಿ.ಎರಡರ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ಸ್ಥಿರವಾಗಿದ್ದರೆ ಅಥವಾ ಯಾವುದೇ ಗಮನಾರ್ಹ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲದಿದ್ದರೆ (ಸಹಜವಾಗಿ, ಅವರ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ವಿಧಾನ 2 ರಲ್ಲಿನ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಸಹ ಪೂರೈಸುತ್ತವೆ), ಇದರರ್ಥ RNA ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಉಳಿದ RNase ಮಾಲಿನ್ಯವಿಲ್ಲ ಮತ್ತು RNA ಯ ಗುಣಮಟ್ಟವು ತುಂಬಾ ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ.ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, 70 ° C ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾದ ಮಾದರಿಯು ಸ್ಪಷ್ಟವಾದ ಅವನತಿಯನ್ನು ತೋರಿಸಿದರೆ, RNA ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ RNase ಮಾಲಿನ್ಯವಿದೆ ಎಂದು ಅದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
 
2 ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ವಿಧಾನಗಳು ಮತ್ತು ತಂತ್ರಗಳು
ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯುವಾಗ ನಾವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಎದುರಿಸುವ ಸಮಸ್ಯೆಗಳೆಂದರೆ: (1) ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಇಳುವರಿ ಕಡಿಮೆ;(2) ಆರ್ಎನ್ಎ ಗಂಭೀರವಾದ ಉಪ್ಪು ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ;(3) ಆರ್ಎನ್ಎ ಗಂಭೀರ ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ;(4) ಮಾದರಿ ಅವನತಿ ಮತ್ತು ಇತರ ಸಮಸ್ಯೆಗಳು
 
1. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಒಟ್ಟು RNA ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಕಾರಕಗಳು
ಗ್ವಾನಿಡಿನ್ ಐಸೊಥಿಯೋಸೈನೇಟ್ ವಿಧಾನ ಮತ್ತು ಟ್ರೈಝೋಲ್ ವಿಧಾನಗಳು ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಜೀವಕೋಶಗಳಿಂದ ಒಟ್ಟು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ವಿಧಾನಗಳಾಗಿವೆ.ಮೊಲದ ಚರ್ಮ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಸಂಯೋಜಕ ಅಂಗಾಂಶದಿಂದ ಒಟ್ಟು RNA ಯ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯಂತಹ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಕಷ್ಟಕರವಾದ ಸಣ್ಣ ಮಾದರಿಗಳು ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗೆ ಇದು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ;ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಟ್ರೈಝೋಲ್ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯ ಉದ್ದೇಶದ ಲೈಸಿಸ್ ಕಾರಕವಾಗಿ, ಸಸ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳು, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ, ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಗೆ ಸಹ ಬಳಸಬಹುದು.ಕ್ಯಾಮೆಲಿಯಾ ಒಲಿಫೆರಾ, ಚಹಾ ಎಲೆಗಳು, ರಾಪ್ಸೀಡ್, ಇತ್ಯಾದಿಗಳಂತಹ ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪಾಲಿಫಿನಾಲ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸಸ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗೆ, ಒಟ್ಟು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು CTAB ವಿಧಾನವನ್ನು ಸಹ ಬಳಸಬಹುದು.

ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ವಿಧಾನವಾಗಿ, ಡಬಲ್-ಕಾಲಮ್ ವಿಧಾನವು ಅದರ ಸಾಮಾನ್ಯ ತಾಪಮಾನದ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿ ಬಹಳ ಜನಪ್ರಿಯವಾಗಿದೆ, RNase ಅನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಸುರಕ್ಷತೆ-ಯಾವುದೇ ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್, ಫೀನಾಲ್ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಸಾವಯವ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಇಲ್ಲ.(ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಿದ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು )

1
2

2. ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಂದ ಒಟ್ಟು ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ
 
(1) ತಾಜಾ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿ, ಅದು ತಾಜಾವಾಗಿಲ್ಲದಿದ್ದರೆ (ಮೇಲಾಗಿ ಮೂರು ತಿಂಗಳೊಳಗೆ - 80 ℃ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್ ಅಥವಾ ದ್ರವ ಸಾರಜನಕದಲ್ಲಿ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿರುತ್ತದೆ. ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಕತ್ತರಿಸುವಾಗ, ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ನೇರವಾಗಿ ಕತ್ತರಿಸಬೇಡಿ, ಅದನ್ನು ಐಸ್ ಬಾಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲು ಮರೆಯದಿರಿ, ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಘನೀಕರಣ ಮತ್ತು ಕರಗುವಿಕೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿ.
(2) ಸಣ್ಣ ತುಂಡು ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಕತ್ತರಿಸಲು ಶುದ್ಧವಾದ ಕತ್ತರಿ ಮತ್ತು ಚಿಮುಟಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ, ಮಾದರಿಯನ್ನು ಕತ್ತರಿಸುವಾಗ ಅಂಗಾಂಶದ ಕೇಂದ್ರ ಭಾಗವನ್ನು ಕತ್ತರಿಸಲು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿ, ಅಥವಾ ಮೊದಲು ಮಧ್ಯದಿಂದ ದೊಡ್ಡ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಕತ್ತರಿಸಿ, ತದನಂತರ ತಾಜಾ ಛೇದನದ ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಕತ್ತರಿಸಿ.ತೆಗೆದ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಚೂರುಚೂರು ಮಾಡಬೇಕು, ಚೂರುಚೂರು ಮಾಡಿದ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಆರ್‌ನೇಸ್ ಇಲ್ಲದೆ ಇಪಿ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ ಹಾಕಿ, ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಚೂರುಚೂರು ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಲೈಸೇಟ್‌ಗೆ ಒಡ್ಡಬೇಕು ಮತ್ತು ಏಕರೂಪತೆಗೆ ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಬೇಕು.

(3) ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗೆ, ಏಕರೂಪೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಮುಂಗ್ ಬೀನ್ ಗಾತ್ರದ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು (30-60 mg) ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ.ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದ ಪ್ರೋಟೀನ್, ಕೊಬ್ಬು ಅಥವಾ ಯಕೃತ್ತಿನಂತಹ ದಟ್ಟವಾದ ನಾರಿನ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರೆ, ಕತ್ತರಿಸಿದ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಅಥವಾ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ (ಐಚ್ಛಿಕ) 10~20 ಮಿಗ್ರಾಂ ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ).
(4) ಮೀನಿನ ಸ್ನಾಯು, ಸೀಗಡಿ ಮಾಂಸ, ಜೆಲ್ಲಿ ಮೀನು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ನೀರಿನ ಅಂಶವಿರುವ ಇತರ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಿದರೆ, ಮಾದರಿಯ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಬೇಕು (100-200 ಮಿಗ್ರಾಂ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ).
(5) ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ಅನುಮತಿಸಿದರೆ, ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಹೈ-ಪಾಸೇಜ್ ಟಿಶ್ಯೂ ಹೋಮೋಜೆನೈಜರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಹೋಮೋಜೆನೈಸ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ ನೇರವಾಗಿ ಹೊರತೆಗೆಯಬಹುದು, ಅಂತಹ ಯಾವುದೇ ಸಾಧನವಿಲ್ಲದಿದ್ದರೆ.
(6) ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯ ಅವನತಿಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಅಂತಿಮ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯ ನಂತರ ಪಡೆದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ತಕ್ಷಣವೇ ಐಸ್ ಬಾಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಬೇಕು.

3. ಪ್ರಾಣಿ ಕೋಶ ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ

(1) ಅಮಾನತು ಕೋಶಗಳು: ನೇರವಾಗಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮತ್ತು ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ತ್ಯಜಿಸಿ, 1-2 ಬಾರಿ ಕ್ರಿಮಿನಾಶಕ PBS ನೊಂದಿಗೆ ತೊಳೆಯಿರಿ, ನಂತರ ಸೂಕ್ತ ಪ್ರಮಾಣದ PBS ನೊಂದಿಗೆ ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸಿ ಮತ್ತು ನಂತರ ಲಿಸಿಸ್ಗಾಗಿ ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ.ದ್ರವವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ತ್ಯಜಿಸಿದ ನಂತರ ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಅವಕ್ಷೇಪಿತ ಕೋಶಗಳಿಗೆ ಸೇರಿಸಬೇಡಿ.ಇದು ಹೊರ ಪದರದ ಮೇಲಿನ ಲೈಸ್ಡ್ ಕೋಶಗಳ ನಂತರ ಬಿಡುಗಡೆಯಾದ ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಪ್ಯಾಕೇಜ್ ಅವಕ್ಷೇಪಿತ ಕೋಶಗಳ ಹೊರಭಾಗಕ್ಕೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಂತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಲೈಸೇಟ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಕಣಕದೊಳಗಿನ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಂಪರ್ಕವನ್ನು ಸೀಮಿತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ., ಅಪೂರ್ಣ ಜೀವಕೋಶದ ವಿಘಟನೆ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆಯಾದ RNA ಇಳುವರಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.

(2) ಅರೆ-ಅಂಟಿಕೊಂಡಿರುವ ಅಥವಾ ಬಿಗಿಯಾಗಿ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳದ ಕೋಶಗಳು: ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ತ್ಯಜಿಸಿದ ನಂತರ, PBS ನೊಂದಿಗೆ 1-2 ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಿರಿ, ನಂತರ ನೇರವಾಗಿ PBS ಅನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಿ ಮತ್ತು ಕೋಶಗಳನ್ನು ಸ್ಫೋಟಿಸಲು ಪೈಪೆಟ್ ಅಥವಾ ಗನ್‌ನಿಂದ ಕಲ್ಚರ್ ಡಿಶ್ ಅನ್ನು ಸ್ಫೋಟಿಸಿ ಮತ್ತು ಅವುಗಳನ್ನು RNA-ಮುಕ್ತ ಕೋಶಗಳಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ.ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಕಿಣ್ವದ EP ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ.

(3) ಅಂಟಿಕೊಂಡಿರುವ ಕೋಶಗಳು: ಮೊದಲು ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಜೀರ್ಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಬೇಕು, ನಂತರ RNase-ಮುಕ್ತ EP ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು, ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗೊಳಿಸಬೇಕು, ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು PBS ನೊಂದಿಗೆ 1-2 ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಬೇಕು ಮತ್ತು ಸೂಕ್ತವಾದ PBS ನೊಂದಿಗೆ ಮರುಹೊಂದಿಸಬೇಕು ನಂತರ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಹಂತಕ್ಕೆ ಮುಂದುವರಿಯಿರಿ.

4. ಸಸ್ಯ ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ

ಸಸ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಫೀನಾಲಿಕ್ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಲ್ಲಿ ಸಮೃದ್ಧವಾಗಿವೆ, ಅಥವಾ ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಸಮೃದ್ಧವಾಗಿವೆ, ಅಥವಾ ಕೆಲವು ಗುರುತಿಸಲಾಗದ ದ್ವಿತೀಯಕ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಅಥವಾ RNase ನ ಹೆಚ್ಚಿನ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ.ಜೀವಕೋಶದ ವಿಘಟನೆಯ ನಂತರ ಈ ವಸ್ತುಗಳು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯೊಂದಿಗೆ ಕರಗದ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳು ಅಥವಾ ಕೊಲೊಯ್ಡಲ್ ಅವಕ್ಷೇಪಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಬಿಗಿಯಾಗಿ ಸಂಯೋಜಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ, ಇವುಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಕಷ್ಟವಾಗುತ್ತದೆ.ಆದ್ದರಿಂದ, ನಾವು ಸಸ್ಯ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯುವಾಗ, ನಾವು ಸಸ್ಯಗಳಿಗೆ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಆರಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ.ಕಿಟ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಲೈಸೇಟ್ ಪಾಲಿಫಿನಾಲ್‌ಗಳ ಸುಲಭ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ ಮತ್ತು ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ಸಮಸ್ಯೆಗಳನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಪರಿಹರಿಸುತ್ತದೆ.

(ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್ ಪಾಲಿಫಿನಾಲ್ ಸಸ್ಯ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಗಾಗಿ, ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಿದ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು:

(1) ಸಸ್ಯದ ಸಿಪ್ಪೆ, ತಿರುಳು, ಬೀಜಗಳು, ಎಲೆಗಳು ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಗಾರೆಯಲ್ಲಿ ಪುಡಿಮಾಡಬೇಕು.ರುಬ್ಬುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ, ಮಾದರಿಯನ್ನು ಕರಗಿಸುವುದನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ದ್ರವ ಸಾರಜನಕವನ್ನು ಸಮಯಕ್ಕೆ ಮರುಪೂರಣಗೊಳಿಸಬೇಕು.ನೆಲದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಲೈಸೇಟ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಅವನತಿಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಅಲ್ಲಾಡಿಸಬೇಕು.

(2) ಅಕ್ಕಿ ಮತ್ತು ಗೋಧಿ ಎಲೆಗಳಂತಹ ಫೈಬರ್-ಸಮೃದ್ಧ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬೇಕು, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಅಂಗಾಂಶ ಗ್ರೈಂಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಲೈಸಿಸ್ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುವುದಿಲ್ಲ, ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಕಡಿಮೆ ಇಳುವರಿಯಾಗುತ್ತದೆ.

(3) ದಾಳಿಂಬೆ ಹಣ್ಣು, ಕಲ್ಲಂಗಡಿ ಹಣ್ಣು, ಪೀಚ್ ಹಣ್ಣು ಇತ್ಯಾದಿಗಳಂತಹ ಹೆಚ್ಚಿನ ನೀರಿನ ಅಂಶವಿರುವ ಸಸ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗೆ, ಮಾದರಿ ಗಾತ್ರವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಬೇಕು (100-200 ಮಿಗ್ರಾಂ ಐಚ್ಛಿಕ).

(4) ಸಸ್ಯದ ಎಲೆಗಳು, ಬೇರುಕಾಂಡಗಳು, ಗಟ್ಟಿಯಾದ ಹಣ್ಣುಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ವಸ್ತುಗಳಂತಹ ಸಸ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ದ್ರವರೂಪದ ಸಾರಜನಕವನ್ನು ಬಳಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದ್ದು, ಒಂದು ಗಾರೆಯಲ್ಲಿರುವ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಾರ್ಟರ್ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು ನಂತರ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಹಂತಕ್ಕೆ ಮುಂದುವರಿಯಿರಿ.ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಟಿಶ್ಯೂ ಹೋಮೋಜೆನೈಜರ್‌ಗಳು ಸಸ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ಏಕರೂಪಗೊಳಿಸುವಲ್ಲಿ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿರುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ.

5. ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಗೆ ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳು

(1) ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಘನೀಕರಣ ಮತ್ತು ಕರಗುವಿಕೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಅಂಗಾಂಶದ ಮಾದರಿಗಳು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ತಾಜಾವಾಗಿರಬೇಕು.

(2) ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಅಂಗಾಂಶವು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಗ್ರೌಂಡ್ ಆಗಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶದ ಪ್ರಮಾಣವು ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿರಬಾರದು, ಅದು ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚು.

(3) ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಲೈಸ್ ಮಾಡಲು ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ ಸಾಕಷ್ಟು ಕಾವುಕೊಡುವ ಸಮಯವನ್ನು ನೀಡಬೇಕು.

(4) ಟ್ರೈಝೋಲ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಬಳಸುವಾಗ, ಶ್ರೇಣೀಕರಣದ ನಂತರ ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್ ಅನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ತತ್ವವು "ಹೆಚ್ಚು ಇನ್ಹೇಲ್ ಮಾಡುವುದಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಉಸಿರಾಡಲು ಆದ್ಯತೆ", ಮತ್ತು ಮಧ್ಯದ ಪದರಕ್ಕೆ ಹೊರತೆಗೆಯಬಾರದು, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಅದು ಗಂಭೀರವಾದ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ.

(5) ತೊಳೆಯುವಾಗ, ತೊಳೆಯುವ ದ್ರವವು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ತೊಳೆಯುವುದನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಟ್ಯೂಬ್ ಗೋಡೆಯ ಸುತ್ತಲೂ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ನುಸುಳಬೇಕು.

(6) ಕಾಲಮ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ವಿಧಾನಕ್ಕಾಗಿ, ತೊಳೆಯುವ ನಂತರ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವುದರ ಜೊತೆಗೆ, ಹೊರಹೀರುವಿಕೆ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಕ್ಲೀನ್ ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕವನ್ನು ಶುಷ್ಕತೆಗೆ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಆವಿಯಾಗಿಸಲು 5-10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬೀಸಬೇಕು.

(7) ಕಾಲಮ್ ವಿಧಾನದ ಕೊನೆಯ ಎಲುಷನ್‌ನಲ್ಲಿ, DEPC ನೀರನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ, ಅದನ್ನು 3-5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಬೇಕು ಅಥವಾ DEPC ನೀರನ್ನು ಮುಂಚಿತವಾಗಿ 60 ° C ಗೆ ಬಿಸಿಮಾಡಬೇಕು.ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಟ್ರೈಝೋಲ್ ಸೀಳುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಐಸೊಪ್ರೊಪನಾಲ್ ಅವಕ್ಷೇಪನ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ, ಅಂತಿಮ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಡಿಇಪಿಸಿ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ವಿಸರ್ಜನೆಗೆ ಸೂಕ್ತ ಸಮಯವನ್ನು ನೀಡಬೇಕು ಮತ್ತು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಟ್ಯೂಬ್‌ನ ಕೆಳಭಾಗವನ್ನು ಪೈಪೆಟ್ ತುದಿಯಿಂದ ನಿರಂತರವಾಗಿ ಊದಬೇಕು.

3 ಟಿhree ಕಡಿಮೆ RNA ಸಾಂದ್ರತೆ/ಕಳಪೆ ಗುಣಮಟ್ಟಕ್ಕೆ ಕಾರಣಗಳು ಮತ್ತು ಪರಿಹಾರಗಳು
 
1. ಇಳುವರಿ ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ
ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಮಾದರಿಯು ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ, ಒಟ್ಟು ಮೊತ್ತವು ಸಾಕಷ್ಟಿಲ್ಲ, ಅಥವಾ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಮಾದರಿಯು ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚು ಮತ್ತು ಲೈಸಿಸ್ ಪೂರ್ಣವಾಗಿಲ್ಲ;ಅಂಗಾಂಶ ಅಥವಾ ಸರಿಯಾದ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಬಳಸಬೇಕು, ಮಾದರಿಯ ಪೂರ್ವ-ಚಿಕಿತ್ಸೆಯನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಾಡಬೇಕು ಮತ್ತು ಲೈಸಿಸ್ ಸಾಕಷ್ಟು ಇರಬೇಕು.
 
2. ಜಿನೋಮ್ ಅವಶೇಷಗಳು
ಟ್ರೈಝೋಲ್ ವಿಧಾನದಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಾಗ, ಲೇಯರಿಂಗ್ ನಂತರ ಮಧ್ಯದ ಪದರಕ್ಕೆ ಸೂಪರ್ನಾಟಂಟ್ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಲ್ಪಟ್ಟಾಗ, ಗಂಭೀರ ಜೀನೋಮ್ ಮಾಲಿನ್ಯವು ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ;ಮಧ್ಯದ ಪದರಕ್ಕೆ ಹೀರುವುದನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಲೇಯರಿಂಗ್ ಮಾಡುವಾಗ ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾಳಜಿಯನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬೇಕು.ಕಾಲಮ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಬಳಸಿದರೆ, DNase I ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು.ಪೊರೆಯ ಮೇಲೆ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲವು ನೇರವಾಗಿ DNase I ನೊಂದಿಗೆ ಜೀರ್ಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು DNA ಅವಶೇಷಗಳನ್ನು ಬಹಳವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
 
3. ಆರ್ಎನ್ಎ ಅವನತಿ
ಇದು ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಮಾದರಿಯ ಅವನತಿಯಾಗಿರಬಹುದು ಅಥವಾ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಉಂಟಾಗುವ ಅವನತಿಯಾಗಿರಬಹುದು;ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು, ತಾಜಾ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಬಳಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ದ್ರವ ಸಾರಜನಕ ಅಥವಾ -80 ° C ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಮಯಕ್ಕೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಘನೀಕರಣ ಮತ್ತು ಕರಗುವಿಕೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಬೇಕು.ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ RNase/DNase ಉಚಿತ ಸಲಹೆಗಳು, ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಬಳಸಬೇಕು.ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ವೇಗವಾಗಿರಬೇಕು.ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಐಸ್ ಬಾಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಸಮಯಕ್ಕೆ -80 ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು.ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ನಿಂದ ಪತ್ತೆ ಮಾಡಬೇಕಾದರೆ, ಹೊರತೆಗೆದ ತಕ್ಷಣ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಹೊಸದಾಗಿ ತಯಾರಿಸಿದ ಒಂದಕ್ಕೆ ಬದಲಾಯಿಸಬೇಕು.
 
4. ಉಪ್ಪು ಮತ್ತು ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕ ಉಳಿಕೆಗಳು
ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಕಾರಕಗಳು ಫೀನಾಲ್ ಮತ್ತು ಗ್ವಾನಿಡಿನ್ ಲವಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವು ಎಥೆನಾಲ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ.ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ, ಲೈಸೇಟ್ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಹೀರಲ್ಪಡಲಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ತಿರಸ್ಕರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿತು ಮತ್ತು ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಒಣಗಲಿಲ್ಲ.ಉಳಿದ ಲವಣಗಳು ಮತ್ತು ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕಗಳು ನಂತರದ ಹಿಮ್ಮುಖ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಮತ್ತು PCR ಗೆ ಹಾನಿಕಾರಕವಾಗಿದೆ.ಪ್ರತಿಬಂಧದ ವಿವಿಧ ಹಂತಗಳು, ಆದ್ದರಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಅಂಗಾಂಶ ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಬೇಕು, ಮತ್ತು ತೊಳೆಯುವಿಕೆಯು ಸಾಕಾಗುತ್ತದೆ ಆದ್ದರಿಂದ ಟ್ಯೂಬ್ನ ಸುತ್ತಮುತ್ತಲಿನ ಗೋಡೆಗಳನ್ನು ತೊಳೆಯಬಹುದು.ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಖಾಲಿಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಊದುವುದು ಅವಶ್ಯಕ ಹಂತವಾಗಿದೆ, ಇದು ಸಾವಯವ ವಸ್ತುಗಳ ಶೇಷವನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
 
ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯ ಕುರಿತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಾಹಿತಿಗಾಗಿ, ದಯವಿಟ್ಟು ನಮ್ಮ ವೆಬ್‌ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ:
ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಾಹಿತಿಗಾಗಿ www.foreivd.com.

7

ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ಡಿಸೆಂಬರ್-01-2022