ನನ್ನ ಮನಸ್ಸಿನಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ಇತಿಹಾಸದಲ್ಲಿ ಹಲವಾರು ಕ್ರಾಂತಿಕಾರಿ ಆವಿಷ್ಕಾರಗಳು ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬೈಂಡಿಂಗ್, PCR ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಅನುಕ್ರಮ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ತತ್ವವನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ಇಮ್ಯುನೊಲೇಬಲ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವಾಗಿದೆ.ಇಂದು ನಾವು ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ಬಗ್ಗೆ ಮಾತನಾಡುತ್ತೇವೆ.ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ವಿಕಾಸದ ಪ್ರಕಾರ, ಜನರು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವನ್ನು ಮೂರು ತಲೆಮಾರುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸುತ್ತಾರೆ: ಸಾಮಾನ್ಯ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ, ನೈಜ-ಸಮಯದ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ.
Cಓಮನ್ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರ
ಕ್ಯಾರಿ ಮುಲ್ಲಿಸ್ (1944.12.28-2019.8.7)
ಕ್ಯಾರಿ ಮುಲ್ಲಿಸ್ 1983 ರಲ್ಲಿ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ (ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್, ಪಿಸಿಆರ್) ಅನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿದನು. ಅವನು ತನ್ನ ಗೆಳತಿಯನ್ನು ಓಡಿಸುತ್ತಿದ್ದಾಗ, ಅವನು ಇದ್ದಕ್ಕಿದ್ದಂತೆ ಸ್ಫೂರ್ತಿಯ ಮಿಂಚನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದನು ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ (ಚಾಲನೆಯ ಪ್ರಯೋಜನಗಳ ಕುರಿತು) ತತ್ವದ ಬಗ್ಗೆ ಯೋಚಿಸಿದನು ಎಂದು ಹೇಳಲಾಗುತ್ತದೆ.ಕ್ಯಾರಿ ಮುಲ್ಲಿಸ್ ಅವರಿಗೆ 1993 ರಲ್ಲಿ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರದಲ್ಲಿ ನೊಬೆಲ್ ಪ್ರಶಸ್ತಿಯನ್ನು ನೀಡಲಾಯಿತು. ನ್ಯೂಯಾರ್ಕ್ ಟೈಮ್ಸ್ ಕಾಮೆಂಟ್ ಮಾಡಿದೆ: "ಹೆಚ್ಚು ಮೂಲ ಮತ್ತು ಗಮನಾರ್ಹ, ಬಹುತೇಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರವನ್ನು ಪೂರ್ವ-ಪಿಸಿಆರ್ ಮತ್ತು ನಂತರದ ಪಿಸಿಆರ್ ಯುಗಗಳಾಗಿ ವಿಭಜಿಸುತ್ತದೆ.
ಪಿಸಿಆರ್ ತತ್ವ: ಡಿಎನ್‌ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನ ವೇಗವರ್ಧನೆಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ, ಮದರ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನಂತೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಆರಂಭಿಕ ಹಂತವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್‌ಎ ಮದರ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗೆ ಪೂರಕವಾದ ಮಗಳು ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಡಿನಾಟರೇಶನ್, ಅನೆಲಿಂಗ್, ಎಕ್ಸ್‌ಟೆನ್ಶನ್ ಮತ್ತು ಇತರ ಹಂತಗಳ ಮೂಲಕ ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ನಕಲಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಇದು ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್‌ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ ವರ್ಧನೆ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವಾಗಿದೆ, ಇದು ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಗುರಿಯ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ.
ಸಾಮಾನ್ಯ ಪಿಸಿಆರ್ನ ಪ್ರಯೋಜನಗಳು
1.ಕ್ಲಾಸಿಕ್ ವಿಧಾನ, ಸಂಪೂರ್ಣ ಅಂತರರಾಷ್ಟ್ರೀಯ ಮತ್ತು ದೇಶೀಯ ಮಾನದಂಡಗಳು
2.ಉಪಕರಣ ಕಾರಕಗಳ ಕಡಿಮೆ ಬೆಲೆ
3.PCR ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ಇತರ ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ಮರುಪಡೆಯಬಹುದು
ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾದ Foregene PCR ಯಂತ್ರ: https://www.foreivd.com/foreamp-sn-695-series-thermal-cycler-96-wells-pcr-machine-product/
ಸಂಬಂಧಿತ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು: https://www.foreivd.com/pcr-herotm-with-dye-product/
ಸಾಮಾನ್ಯ ಪಿಸಿಆರ್ನ ಅನಾನುಕೂಲಗಳು
1.ಮಾಲಿನ್ಯಕ್ಕೆ ಸುಲಭ
2.ತೊಡಕಿನ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆ
3.ಗುಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮಾತ್ರ
4.ಮಧ್ಯಮ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ
5.ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆ ಇದೆ, ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಬ್ಯಾಂಡ್ ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ನ ಗಾತ್ರದಲ್ಲಿದ್ದಾಗ, ಅದನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ
Cಅಪಿಲರಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಆಧಾರಿತ PCR
ಸಾಮಾನ್ಯ ಪಿಸಿಆರ್ನ ನ್ಯೂನತೆಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ, ಕೆಲವು ತಯಾರಕರು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ನ ತತ್ವವನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ಉಪಕರಣಗಳನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸಿದ್ದಾರೆ.ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆಯ ನಂತರ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಹಂತವು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡಿದೆ.ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯು ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಹಲವಾರು ಬೇಸ್‌ಗಳ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ವರ್ಧನೆಯನ್ನು MAERKER ನಿಂದ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಬಹುದು.ಉತ್ಪನ್ನದ ವಿಷಯ.ಅನನುಕೂಲವೆಂದರೆ ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಇನ್ನೂ ತೆರೆಯಬೇಕು ಮತ್ತು ಉಪಕರಣಕ್ಕೆ ಹಾಕಬೇಕು ಮತ್ತು ಇನ್ನೂ ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯವಿದೆ.
CಅಪಿಲರಿEಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್
2. ರಿಯಲ್-ಟೈಮ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಪಿಸಿಆರ್ (ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ರಿಯಲ್-ಟೈಮ್ ಪಿಸಿಆರ್, ಕ್ಯೂಪಿಸಿಆರ್) ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ1995 ರಲ್ಲಿ PE (ಪರ್ಕಿನ್ ಎಲ್ಮರ್) ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಹೊಸ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವಾಗಿದ್ದು, ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಅನ್ನು 1995 ರಲ್ಲಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ನ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯ ಇತಿಹಾಸವು ABI, ರೋಚೆ ಮತ್ತು ಬಯೋರಾಡ್ ಮತ್ತು ಬಯೋರೆಡ್ ನಂತಹ ದೈತ್ಯರ ಹೋರಾಟದ ಇತಿಹಾಸವಾಗಿದೆ.ನಿಮಗೆ ಆಸಕ್ತಿ ಇದ್ದರೆ, ನೀವು ಅದನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಬಹುದು.ಈ ತಂತ್ರವು ಪ್ರಸ್ತುತ ಅತ್ಯಂತ ಪ್ರಬುದ್ಧ ಮತ್ತು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಅರೆ-ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ.
ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾದ qPCR ಯಂತ್ರ:https://www.foreivd.com/mini-real-time-pcr-system-forequant-sf2sf4-product/
ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಡೈ ವಿಧಾನ (SYBR ಗ್ರೀನ್ I):SYBR ಗ್ರೀನ್ I ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಗಾಗಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ DNA-ಬಂಧಿಸುವ ಬಣ್ಣವಾಗಿದೆ, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ DNA ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ.ಮುಕ್ತ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, SYBR ಗ್ರೀನ್ ದುರ್ಬಲ ಪ್ರತಿದೀಪಕವನ್ನು ಹೊರಸೂಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಒಮ್ಮೆ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎಗೆ ಬಂಧಿಸಿದರೆ, ಅದರ ಪ್ರತಿದೀಪಕತೆಯು 1000-ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ.ಆದ್ದರಿಂದ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಿಂದ ಹೊರಸೂಸುವ ಒಟ್ಟು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತವು ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ DNA ಯ ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವರ್ಧಿತ ಉತ್ಪನ್ನದ ಹೆಚ್ಚಳದೊಂದಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ.ಬಣ್ಣವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎಗೆ ಬಂಧಿಸುವುದರಿಂದ, ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ರಚಿಸಬಹುದು.
ಸಂಬಂಧಿತ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು: https://www.foreivd.com/real-time-pcr-easytm-sybr-green-i-kit-product/
ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಬ್ ವಿಧಾನ (ತಕ್ಮನ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ): ಸಮಯದಲ್ಲಿಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆ, ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ತನಿಖೆಯನ್ನು ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ಜೋಡಿಯಾಗಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ತನಿಖೆಯು ರೇಖೀಯ ಆಲಿಗೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಆಗಿದ್ದು, ಪ್ರತಿದೀಪಕ ವರದಿಗಾರ ಗುಂಪು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಕ್ವೆಂಚರ್ ಗುಂಪನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಎರಡೂ ತುದಿಗಳಲ್ಲಿ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ತನಿಖೆಯು ಅಖಂಡವಾಗಿದ್ದಾಗ, ವರದಿಗಾರ ಗುಂಪಿನಿಂದ ಹೊರಸೂಸಲ್ಪಟ್ಟ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತವು ಕ್ವೆಂಚರ್ ಗುಂಪಿನಿಂದ ಹೀರಲ್ಪಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತವಿಲ್ಲ ಎಂದು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆ;ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ (ವಿಸ್ತರಣೆ ಹಂತದಲ್ಲಿ), ಟಕ್ ಕಿಣ್ವದ 5'-3' ಡೈಸರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ತನಿಖೆಯನ್ನು ಜೀರ್ಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕ್ಷೀಣಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ವರದಿಗಾರ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಗುಂಪು ಮತ್ತು ಕ್ವೆಂಚರ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಗುಂಪನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಮಾನಿಟರಿಂಗ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಅನ್ನು ಸ್ವೀಕರಿಸಬಹುದು, ಅಂದರೆ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಪ್ರತಿ ಬಾರಿಯೂ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತಗಳ ಶೇಖರಣೆ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ರಚನೆಯ ಸಿಂಕ್ರೊನೈಸೇಶನ್.ತಕ್ಮಾನ್ ಪ್ರೋಬ್ ವಿಧಾನವು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಪತ್ತೆಯಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಪತ್ತೆ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ.
ಸಂಬಂಧಿತ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು: https://www.foreivd.com/quickeasy%e1%b5%80%e1%b4%b9-real-time-pcr-kit-taqman-product/
qPCR ನ ಪ್ರಯೋಜನಗಳು
1.ವಿಧಾನವು ಪ್ರಬುದ್ಧವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪೋಷಕ ಉಪಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ಕಾರಕಗಳು ಪೂರ್ಣಗೊಂಡಿವೆ
2.ಕಾರಕಗಳ ಮಧ್ಯಮ ವೆಚ್ಚ
3.ಬಳಸಲು ಸುಲಭ
4.ಹೆಚ್ಚಿನ ಪತ್ತೆ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ
qPCR ನ ಅನಾನುಕೂಲಗಳು
ಗುರಿ ಜೀನ್‌ನ ರೂಪಾಂತರವು ತಪ್ಪಿದ ಪತ್ತೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.
ಕಡಿಮೆ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನ ಪತ್ತೆ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ.
ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಪತ್ತೆಗಾಗಿ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಕರ್ವ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುವಾಗ ದೊಡ್ಡ ದೋಷವಿದೆ.
3. ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ (ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್, ಡಿಪಿಸಿಆರ್) ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ
ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಅಣುಗಳ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣದ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ.qPCR ನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಡಿಜಿಟಲ್ PCR ನೇರವಾಗಿ DNA/RNA ಅಣುಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಓದಬಹುದು, ಇದು ಆರಂಭಿಕ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಅಣುಗಳ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಮಾಣವಾಗಿದೆ.1999 ರಲ್ಲಿ, ಬರ್ಟ್ ವೊಗೆಲ್‌ಸ್ಟೈನ್ ಮತ್ತು ಕೆನ್ನೆತ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಕಿನ್-ಜ್ಲರ್ ಔಪಚಾರಿಕವಾಗಿ ಡಿಪಿಸಿಆರ್ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯನ್ನು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಿದರು.
2006 ರಲ್ಲಿ, Fluidigm ವಾಣಿಜ್ಯ ಚಿಪ್-ಆಧಾರಿತ dPCR ಉಪಕರಣವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಮೊದಲನೆಯದು.2009 ರಲ್ಲಿ, ಲೈಫ್ ಟೆಕ್ನಾಲಜೀಸ್ OpenArray ಮತ್ತು QuantStudio 12K ಫ್ಲೆಕ್ಸ್ dPCR ಸಿಸ್ಟಮ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಿತು.2013 ರಲ್ಲಿ, ಲೈಫ್ ಟೆಕ್ನಾಲಜೀಸ್ QuantStudio 3DdPCR ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಿತು, ಇದು 20,000 ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕೋಶಗಳಿಗೆ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಮವಾಗಿ ವಿತರಿಸಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ನ್ಯಾನೊಸ್ಕೇಲ್ ಮೈಕ್ರೋಫ್ಲೂಯಿಡಿಕ್ ಚಿಪ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಚೆನ್ನಾಗಿ.
2011 ರಲ್ಲಿ, ಬಯೋ-ರಾಡ್ ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್-ಆಧಾರಿತ QX100 dPCR ಉಪಕರಣವನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಿತು, ಇದು ಮಾದರಿಯನ್ನು 20,000 ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್-ವಾಟರ್-ಇನ್-ಆಯಿಲ್‌ಗೆ ಸಮವಾಗಿ ವಿತರಿಸಲು ವಾಟರ್-ಇನ್-ಆಯಿಲ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹನಿಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಕವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ.2012 ರಲ್ಲಿ, ರೈನ್‌ಡ್ಯಾನ್ಸ್ ರೈನ್‌ಡ್ರಾಪ್ ಡಿಪಿಸಿಆರ್ ಉಪಕರಣವನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಿತು, ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ ಒತ್ತಡದ ಅನಿಲದಿಂದ ನಡೆಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಪ್ರತಿ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು 1 ಮಿಲಿಯನ್‌ನಿಂದ 10 ಮಿಲಿಯನ್ ಪಿಕೋಲಿಟರ್ ಮಟ್ಟದ ಸೂಕ್ಷ್ಮ-ಹನಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಎಮಲ್ಷನ್‌ಗೆ ವಿಭಜಿಸಿತು.
ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ, ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಎರಡು ಪ್ರಮುಖ ಬಣಗಳನ್ನು ರಚಿಸಿದೆ, ಚಿಪ್ ಪ್ರಕಾರ ಮತ್ತು ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ಪ್ರಕಾರ.ಯಾವುದೇ ರೀತಿಯ ಡಿಜಿಟಲ್ PCR ಆಗಿರಲಿ, ಅದರ ಪ್ರಮುಖ ತತ್ವಗಳು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆ, ಅಂತ್ಯಬಿಂದು PCR ಮತ್ತು ಪಾಯ್ಸನ್ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಸೀಮಿತಗೊಳಿಸುತ್ತವೆ.ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಹತ್ತಾರು ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಾಗಿ ಸಮಾನವಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದನ್ನು ಚಿಪ್ಸ್ ಅಥವಾ ಮೈಕ್ರೋಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್‌ಗಳಿಗೆ ವಿತರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಪ್ರತಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅಣುವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಏಕ-ಅಣುವಿನ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಪ್ರತಿದೀಪಕವನ್ನು ಓದುವ ಮೂಲಕ ಸಿಗ್ನಲ್ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಅಥವಾ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಎಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅಂಕಿಅಂಶಗಳ ಪಾಯ್ಸನ್ ವಿತರಣೆಯ ಮಾಪನಾಂಕ ನಿರ್ಣಯದ ನಂತರ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ನಾನು ಬಳಸಿದ ಹಲವಾರು ಡಿಜಿಟಲ್ PCR ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್‌ಗಳ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತಿವೆ:
1. ಬಯೋ-ರಾಡ್ QX200 ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ಡಿಜಿಟಲ್ PCR ಬಯೋ-ರಾಡ್QX200 ಅತ್ಯಂತ ಶ್ರೇಷ್ಠ ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್ ಆಗಿದೆ, ಮೂಲ ಪತ್ತೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ: ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ಜನರೇಟರ್‌ನಿಂದ 20,000 ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ವಾಟರ್-ಇನ್-ಆಯಿಲ್ ಮೈಕ್ರೋ-ಡ್ರೊಪ್ಲೆಟ್‌ಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯ ಪಿಸಿಆರ್ ಯಂತ್ರದಲ್ಲಿ ವರ್ಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಪ್ರತಿ ಮೈಕ್ರೋ-ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್‌ನ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಅನ್ನು ಮೈಕ್ರೋ-ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ರೀಡರ್ ಓದುತ್ತದೆ.ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯು ಹೆಚ್ಚು ಜಟಿಲವಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯವು ಮಧ್ಯಮವಾಗಿದೆ.
Xinyi TD1 ಮೈಕ್ರೋ-ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ಡಿಜಿಟಲ್ PCRXinyi TD1 ಒಂದು ದೇಶೀಯ ಡಿಜಿಟಲ್ PCR ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್ ಆಗಿದೆ, ಮೂಲ ಪತ್ತೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ: ಹನಿ ಜನರೇಟರ್ ಮೂಲಕ 30,000-50,000 ನೀರಿನಲ್ಲಿ ತೈಲ ಹನಿಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಿ, ಸಾಮಾನ್ಯ PCR ಉಪಕರಣದಲ್ಲಿ ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಹಾದುಹೋಗುತ್ತದೆ ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ರೀಡರ್ ಪ್ರತಿ ಹನಿಯ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಓದುತ್ತದೆ.ಈ ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಹನಿಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ಓದುವಿಕೆ ಎರಡನ್ನೂ ಕಡಿಮೆ ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯದೊಂದಿಗೆ ಮೀಸಲಾದ ಚಿಪ್ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಸ್ಟಿಲ್ಲಾ ನೈಕಾ ಮೈಕ್ರೋ-ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ಚಿಪ್ ಡಿಜಿಟಲ್ PCRSTILLA Naica ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಹೊಸ ಡಿಜಿಟಲ್ PCR ವೇದಿಕೆಯಾಗಿದೆ.ಮೂಲ ಪತ್ತೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ: ಚಿಪ್‌ಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಚಿಪ್ ಅನ್ನು ಸೂಕ್ಷ್ಮ-ಹನಿಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ವರ್ಧನೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ ಮತ್ತು 30,000 ಸೂಕ್ಷ್ಮ-ಹನಿಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಿ.ಚಿಪ್ನಲ್ಲಿ ಹರಡಿ, ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆಯು ಚಿಪ್ನಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡಿದೆ.ನಂತರ ವರ್ಧಿತ ಚಿಪ್ ಅನ್ನು ಮೈಕ್ರೋ-ಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ರೀಡಿಂಗ್ ಅನಾಲಿಸಿಸ್ ಸಿಸ್ಟಮ್‌ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಅನ್ನು ಓದಲಾಗುತ್ತದೆ.ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಮುಚ್ಚಿದ ಚಿಪ್ನಲ್ಲಿ ನಡೆಯುವುದರಿಂದ, ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯವು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ.
4. ThermoFisher QuantStudio 3D ಚಿಪ್ ಡಿಜಿಟಲ್ PCR
ThermoFisher QuantStudio 3D ಮತ್ತೊಂದು ಕ್ಲಾಸಿಕ್ ಚಿಪ್ ಆಧಾರಿತ ಡಿಜಿಟಲ್ PCR ವೇದಿಕೆಯಾಗಿದೆ.ಇದರ ಮೂಲ ಪತ್ತೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ: ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸ್ಪ್ರೆಡರ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಸ್ಪ್ರೆಡರ್ ಮೂಲಕ 20,000 ಮೈಕ್ರೋವೆಲ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಚಿಪ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸಮವಾಗಿ ಹರಡಿ., ವರ್ಧಿಸಲು PCR ಯಂತ್ರದಲ್ಲಿ ಚಿಪ್ ಅನ್ನು ಹಾಕಿ, ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಚಿಪ್ ಅನ್ನು ರೀಡರ್‌ಗೆ ಹಾಕಿ ಮತ್ತು ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಅನ್ನು ಓದಲು ಫೋಟೋ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ.ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯು ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಜಟಿಲವಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಮುಚ್ಚಿದ ಚಿಪ್ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯವು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ.
5. JN MEDSYS ಸ್ಪಷ್ಟತೆ ಚಿಪ್ ಡಿಜಿಟಲ್ PCR
JN MEDSYS ಸ್ಪಷ್ಟತೆ ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಹೊಸ ಚಿಪ್ ಮಾದರಿಯ ಡಿಜಿಟಲ್ PCR ವೇದಿಕೆಯಾಗಿದೆ.ಇದರ ಮೂಲ ಪತ್ತೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ: ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಲೇಪಕಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ನಲ್ಲಿ ಅಳವಡಿಸಲಾದ 10,000 ಪಿಸಿಆರ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳ ಮೇಲೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಲೇಪಕ ಮೂಲಕ ಸಮವಾಗಿ ಹರಡಿ.ಮೈಕ್ರೊಪೊರಸ್ ಚಿಪ್ನಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಹಾರವು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ಕ್ರಿಯೆಯ ಮೂಲಕ ಚಿಪ್‌ಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಚಿಪ್‌ನೊಂದಿಗೆ PCR ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ PCR ಯಂತ್ರದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಫೋಟೋವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಓದಲು ಚಿಪ್ ಅನ್ನು ರೀಡರ್‌ಗೆ ಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ.ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯು ಹೆಚ್ಚು ಜಟಿಲವಾಗಿದೆ.ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯ ಕಡಿಮೆ.
ಪ್ರತಿ ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್‌ನ ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಸಂಕ್ಷೇಪಿಸಲಾಗಿದೆ:
ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್‌ನ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಸೂಚಕಗಳು: ಸ್ಪ್ಲಿಟ್ ಯೂನಿಟ್‌ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ, ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಚಾನಲ್‌ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ, ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಸಂಕೀರ್ಣತೆ ಮತ್ತು ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯ.ಆದರೆ ಅತ್ಯಂತ ಮುಖ್ಯವಾದ ವಿಷಯವೆಂದರೆ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆಯ ನಿಖರತೆ.ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್‌ಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡುವ ಒಂದು ಮಾರ್ಗವೆಂದರೆ ಪರಸ್ಪರ ಪರಿಶೀಲಿಸಲು ಬಹು ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದು ಮತ್ತು ಇನ್ನೊಂದು ಮಾರ್ಗವೆಂದರೆ ನಿಖರವಾದ ಮೌಲ್ಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದು.
dPCR ನ ಪ್ರಯೋಜನಗಳು
1.ಸಂಪೂರ್ಣ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಸಾಧಿಸುವುದು
2.ಹೆಚ್ಚಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ
3.ಕಡಿಮೆ ನಕಲು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆ ಮಾಡಬಹುದು
dPCR ನ ಅನಾನುಕೂಲಗಳು1. ದುಬಾರಿ ಉಪಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ಕಾರಕಗಳು 2. ಸಂಕೀರ್ಣ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆ ಮತ್ತು ದೀರ್ಘ ಪತ್ತೆ ಸಮಯ 3. ಕಿರಿದಾದ ಪತ್ತೆ ವ್ಯಾಪ್ತಿ
ಪ್ರಸ್ತುತ, ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ಮೂರು ತಲೆಮಾರುಗಳು ತಮ್ಮದೇ ಆದ ಅನುಕೂಲಗಳು ಮತ್ತು ಅನಾನುಕೂಲಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ, ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಯೊಂದೂ ತನ್ನದೇ ಆದ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಒಂದು ಪೀಳಿಗೆಯು ಇನ್ನೊಂದನ್ನು ಬದಲಿಸುವ ಸಂಬಂಧವಲ್ಲ.ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ನಿರಂತರ ಪ್ರಗತಿಯು ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನಕ್ಕೆ ಹೊಸ ಚೈತನ್ಯವನ್ನು ಚುಚ್ಚಿದೆ, ಇದು ಒಂದು ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ದಿಕ್ಕನ್ನು ಇನ್ನೊಂದರ ನಂತರ ಅನ್ಲಾಕ್ ಮಾಡಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಪತ್ತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಅನುಕೂಲಕರ ಮತ್ತು ನಿಖರವಾಗಿದೆ.
ಮೂಲ: ಡಾ. ಯುವಾನ್ ನಿಮ್ಮನ್ನು ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಕರೆದೊಯ್ಯುತ್ತಾರೆ
ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾದ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು:
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ನವೆಂಬರ್-18-2022
