ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮಹೋನ್ನತ ಲಕ್ಷಣವೆಂದರೆ ಅದರ ದೊಡ್ಡ ವರ್ಧನೆಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಮತ್ತು ಅತ್ಯಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆ.ಪಿಸಿಆರ್ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆ ಮತ್ತು ಪತ್ತೆ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುವ ಸಲುವಾಗಿ, ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಮತ್ತು ಪತ್ತೆ ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ನಾವು ಬದ್ಧರಾಗಿದ್ದೇವೆ, ಆದರೆ ತಲೆನೋವು ಪ್ರಯೋಗದ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿದೆ.ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕತೆಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಅಡ್ಡ-ಮಾಲಿನ್ಯ ಅಥವಾ PCR ಉತ್ಪನ್ನದ ಮಾಲಿನ್ಯದ ಒಂದು ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣವು ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕತೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು.
ಐದು ವಿಧದ ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನ ಮಾಲಿನ್ಯ
ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಲಿನ್ಯಕ್ಕೆ ಹಲವು ಕಾರಣಗಳಿವೆ, ಇದನ್ನು ಸ್ಥೂಲವಾಗಿ ಈ ಕೆಳಗಿನ ವರ್ಗಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಬಹುದು:
ಮಾದರಿಯ ಮಾಲಿನ್ಯವು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲು ಕಂಟೇನರ್‌ನ ಮಾಲಿನ್ಯದಿಂದ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಇರಿಸಿದಾಗ, ಸಡಿಲವಾದ ಸೀಲಿಂಗ್‌ನಿಂದ ಅದು ಕಂಟೇನರ್‌ನಿಂದ ಸೋರಿಕೆಯಾಗುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಮಾದರಿಯು ಕಂಟೇನರ್‌ನ ಹೊರಭಾಗಕ್ಕೆ ಅಂಟಿಕೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಅಡ್ಡ-ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ;ಮಾಲಿನ್ಯವು ಮಾದರಿಗಳ ನಡುವೆ ಮಾಲಿನ್ಯಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ;ಕೆಲವು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಯ ಮಾದರಿಗಳು, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ವೈರಸ್‌ಗಳು, ಏರೋಸಾಲ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಹರಡಬಹುದು ಅಥವಾ ಏರೋಸಾಲ್‌ಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸಬಹುದು, ಇದು ಪರಸ್ಪರ ಮಾಲಿನ್ಯಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.
ಮುಖ್ಯ ಕಾರಣವೆಂದರೆ ಪಿಸಿಆರ್ ಕಾರಕಗಳ ತಯಾರಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಮಾದರಿ ಗನ್, ಕಂಟೇನರ್, ಡಬಲ್ ಡಿಸ್ಟಿಲ್ಡ್ ವಾಟರ್ ಮತ್ತು ಇತರ ಪರಿಹಾರಗಳು ಪಿಸಿಆರ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನಿಂದ ಕಲುಷಿತವಾಗುತ್ತವೆ.
ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳು ಮತ್ತು ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡಿದ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್‌ಗಳನ್ನು ಧನಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಾಗಿ ಬಳಸುವ ಕೆಲವು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಲ್ಲಿ, ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡಿದ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಮಾಲಿನ್ಯದ ಸಮಸ್ಯೆಯು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿದೆ.ಏಕೆಂದರೆ ಘಟಕದ ಪರಿಮಾಣದಲ್ಲಿ ಕ್ಲೋನಿಂಗ್ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್‌ನ ವಿಷಯವು ಸಾಕಷ್ಟು ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಉಪಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ಕಾರಕಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಜೀವಂತ ಕೋಶಗಳ ಬಲವಾದ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದಿಂದಾಗಿ ಜೀವಂತ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಕಲುಷಿತಗೊಳ್ಳುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿದೆ.
ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ವರ್ಧಿತ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ಮಾಲಿನ್ಯವು ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯವಾದ ಮಾಲಿನ್ಯ ಸಮಸ್ಯೆಯಾಗಿದೆ.PCR ಉತ್ಪನ್ನದ ನಕಲು ಪ್ರಮಾಣವು ದೊಡ್ಡದಾಗಿರುವ ಕಾರಣ (ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 1013 ಪ್ರತಿಗಳು/ml), ಇದು PCR ಪತ್ತೆ ನಕಲು ಸಂಖ್ಯೆಯ ಮಿತಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನದಾಗಿದೆ, PCR ಉತ್ಪನ್ನದ ಕಶ್ಮಲೀಕರಣದ ಅತ್ಯಲ್ಪ ಪ್ರಮಾಣವು ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕತೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು.
ಏರೋಸಾಲ್ ಮಾಲಿನ್ಯವು ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ಮಾಲಿನ್ಯದ ಬಹುಪಾಲು ರೂಪವಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಕಡೆಗಣಿಸುವುದು ಸುಲಭವಾಗಿದೆ.ದ್ರವ ಮೇಲ್ಮೈ ಮತ್ತು ಗಾಳಿಯ ನಡುವಿನ ಘರ್ಷಣೆಯಿಂದ ಇದು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಮುಚ್ಚಳವನ್ನು ತೆರೆದಾಗ, ಮಾದರಿಯು ಆಕಾಂಕ್ಷೆಯಾದಾಗ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ತೀವ್ರವಾಗಿ ಅಲುಗಾಡಿಸಿದಾಗಲೂ ಏರೋಸಾಲ್ ಮಾಲಿನ್ಯವು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.ಲೆಕ್ಕಾಚಾರಗಳ ಪ್ರಕಾರ, ಏರೋಸಾಲ್ ಕಣವು 48,000 ಪ್ರತಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಹುದು, ಆದ್ದರಿಂದ ಅದರಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಮಾಲಿನ್ಯವು ವಿಶೇಷ ಗಮನಕ್ಕೆ ಅರ್ಹವಾದ ಸಮಸ್ಯೆಯಾಗಿದೆ.
ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಪರೀಕ್ಷಾ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಒಂದೇ ಜೋಡಿ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತವೆ.ಕಾಲಾನಂತರದಲ್ಲಿ, ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಜಾಗದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದ ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನದ ಮಾಲಿನ್ಯವು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ.ಅಂತಹ ಮಾಲಿನ್ಯವು ಸಂಭವಿಸಿದ ನಂತರ, ಕಡಿಮೆ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಅದನ್ನು ತೊಡೆದುಹಾಕಲು ಕಷ್ಟವಾಗುತ್ತದೆ.
ಮೊದಲ ಮೂರು ವಿಧದ ಮಾಲಿನ್ಯಕ್ಕೆ, ನಾವು ತಪ್ಪಿಸಲು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು, ಆದರೆ PCR ಉತ್ಪನ್ನಗಳಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ತಡೆಯುವುದು ಕಷ್ಟ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಪ್ರಮಾಣಿತವಲ್ಲದ PCR ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳ ನಿರ್ಮಾಣದಲ್ಲಿ.ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ, ಪೈಪೆಟ್ ತುದಿ ದ್ರವವನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಊದಿದಾಗ, ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಕವರ್ ತೆರೆದಾಗ, ಏರೋಸಾಲ್ ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.ಏರೋಸಾಲ್ ಒಯ್ಯುವ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಣುಗಳು (ಒಂದು ಏರೋಸಾಲ್ ಹತ್ತಾರು ಡಿಎನ್‌ಎಗಳನ್ನು ಸಾಗಿಸಬಲ್ಲದು) ನಿರ್ಮೂಲನೆ ಮಾಡುವುದು ಕಷ್ಟ ಏಕೆಂದರೆ ಅವು ಗಾಳಿಯಲ್ಲಿ ತೇಲುತ್ತವೆ.ಮುಂದಿನ ಸುತ್ತಿನ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸಿದ ನಂತರ, ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕತೆಗಳು ಅನಿವಾರ್ಯವಾಗಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತವೆ.
ಕೆಳಗಿನ ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ನಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣವು ಅನುಗುಣವಾದ ಆಸಕ್ತಿಯ ಬ್ಯಾಂಡ್ ಅನ್ನು ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ:
ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಲಿನ್ಯ ಮತ್ತು ತಡೆಗಟ್ಟುವಿಕೆಯ ಈ ಸಂಚಿಕೆಯ ಮೊದಲ ಭಾಗವನ್ನು ಇಲ್ಲಿ ಪರಿಚಯಿಸಲಾಗಿದೆ.ಮುಂದಿನ ಸಂಚಿಕೆಯು "ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನ ಮಾಲಿನ್ಯದ ತಡೆಗಟ್ಟುವಿಕೆ" ಎಂಬ ಎರಡನೇ ಭಾಗವನ್ನು ನಿಮಗೆ ತರುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಟ್ಯೂನ್ ಆಗಿರಿ!
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ಜುಲೈ-25-2017
