ಪಿಸಿಆರ್ ಜನನ
ಪಿಸಿಆರ್ (ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್)
ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಆವಿಷ್ಕಾರದಿಂದ 30 ವರ್ಷಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಸಮಯವಾಗಿದೆ.30 ವರ್ಷಗಳಿಗಿಂತಲೂ ಹೆಚ್ಚು ಕಾಲ, ಪ್ರಪಂಚದಾದ್ಯಂತದ ಹಲವಾರು ವಿದ್ವಾಂಸರು ಪೂರಕವಾಗಿ ಮತ್ತು ಸುಧಾರಿಸುವುದನ್ನು ಮುಂದುವರೆಸಿದ ನಂತರ, ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವು ಇಡೀ ಜೀವ ವಿಜ್ಞಾನ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಮತ್ತು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಬಳಸಲಾಗುವ ಮತ್ತು ಪ್ರಮುಖ ಮೂಲ ಸಂಶೋಧನಾ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ.
ಟಚ್‌ಡೌನ್ ಪಿಸಿಆರ್, ರಿಯಲ್-ಟೈಮ್ ಪಿಸಿಆರ್, ಮಲ್ಟಿ ಪಿಸಿಆರ್, ಇತ್ಯಾದಿಗಳು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ವ್ಯಾಪಕ ಅನ್ವಯದ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಹಾಗೆಯೇ ಹೊಸದಾಗಿ ಹೊರಹೊಮ್ಮಿದ ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್ (ಡಿಜಿಟಲ್ ಪಿಸಿಆರ್), ಹೆಚ್ಚಿನ ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಸಂಶೋಧಕರ ಸಂಶೋಧನಾ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಪುಷ್ಟೀಕರಿಸಿದೆ ಮತ್ತು ಆಧುನಿಕ ಜೀವನ ವಿಜ್ಞಾನದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ವೇಗಗೊಳಿಸಿದೆ.
ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ದೋಷಗಳು
ಸಂಕೀರ್ಣ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಮತ್ತುಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ:
★ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ PCR ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ: ಅಗತ್ಯವಿದೆ
★ PCR ಪಡೆದ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ: ಅಗತ್ಯವಿದೆ
★ DNA ಮತ್ತು RNA ಮಾದರಿಗಳು: ದೊಡ್ಡ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು, ಕಷ್ಟಕರವಾದ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳು
★ ದೇಹದ ಅಪಾಯಗಳು: ವಿಷಕಾರಿ ಕಾರಕಗಳು ದೇಹಕ್ಕೆ ಹಾನಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ
ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ವ್ಯುತ್ಪನ್ನ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವು ಪೂರ್ವಾಪೇಕ್ಷಿತ-ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ
ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳನ್ನು ಪೂರೈಸುವ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಯಾವುದೇ ಜೈವಿಕ ಮಾದರಿಯು ಸಂಕೀರ್ಣವಾದ ಮತ್ತು ಬೇಸರದ ಮಾದರಿ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯ ಸರಣಿಯ ಮೂಲಕ ಹೋಗಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ.
ಡಿಎನ್ಎ ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಯಾವಾಗಲೂ ಮೂಲಭೂತ ಕಾರ್ಯವಾಗಿದ್ದು, ಸಂಬಂಧಿತ ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಸಂಶೋಧಕರು ಪ್ರತಿದಿನ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಬೇಕಾಗಿದೆ.
ಮಾದರಿಗಳ ನಡುವಿನ ದೊಡ್ಡ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿಂದಾಗಿ, ಡಿಎನ್ಎ ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳು ಸಹ ವಿಭಿನ್ನವಾಗಿವೆ.ಈ ಕೆಲಸಕ್ಕೆ ನಿರ್ವಾಹಕರಿಗೆ ಉನ್ನತ ಮಟ್ಟದ ತಾಂತ್ರಿಕ ಪ್ರಾವೀಣ್ಯತೆಯ ಅಗತ್ಯವಿದೆ.ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯುವ ತಂತ್ರಗಳಿಗೆ ಕೆಲವು ಹೆಚ್ಚು ವಿಷಕಾರಿ ರಾಸಾಯನಿಕ ಕಾರಕಗಳೊಂದಿಗೆ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಸಂಪರ್ಕದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ.ಇದು ಆಪರೇಟರ್‌ನ ದೇಹಕ್ಕೆ ಬದಲಾಯಿಸಲಾಗದ ಹಾನಿಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಯೋಗದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ನೇರ ಹಾನಿಯನ್ನು ಸಹ ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ.
ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವವರಿಗೆ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯುವುದು ಕಾರ್ಮಿಕ-ತೀವ್ರ ಕಾರ್ಯವಾಗಿದೆ.
ಮಾರುಕಟ್ಟೆಯಲ್ಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಕಿಟ್‌ಗಳು ಈಗ ಪ್ರಬುದ್ಧವಾಗಿವೆ ಮತ್ತು ಹಲವು ಬ್ರಾಂಡ್‌ಗಳಿವೆ, ಆದರೆ ಅವು ಸರಿಸುಮಾರು ಒಂದೇ ಆಗಿವೆ.ಇದು ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್ ಮೆಂಬರೇನ್ ಕಾಲಮ್ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಗಲ್ ಕಿಟ್ ಆಗಿರಲಿ ಅಥವಾ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಬೀಡ್ ವಿಧಾನದ ಕಿಟ್ ಆಗಿರಲಿ, ಇದು ಸಾಕಷ್ಟು ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ದುಬಾರಿಯಾಗಿದೆ.ಕಿಟ್ನ ವೆಚ್ಚದ ಜೊತೆಗೆ, ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಉಪಕರಣಗಳಿಗೆ ವಿಶೇಷ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳು ಸಹ ಇವೆ.ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಬೀಡ್ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ ಕಾರ್ಯಸ್ಥಳವು ಅತ್ಯಂತ ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ದೊಡ್ಡ-ಪ್ರಮಾಣದ ಉನ್ನತ-ಮೌಲ್ಯದ ಸಾಧನವಾಗಿದೆ, ಇದು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಕ್ಕೆ ಭಾರಿ ವೆಚ್ಚವಾಗಿದೆ.
ಸಾರಾಂಶದಲ್ಲಿ
ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ನಡೆಸುವ ಮೊದಲು, ಮಾದರಿಗಳ ಪೂರ್ವಭಾವಿ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯು ಸಂಶೋಧಕರಿಗೆ ಅನಿವಾರ್ಯ ಮತ್ತು ಯಾವಾಗಲೂ ತಲೆನೋವು.ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಹೇಗೆ ಪರಿಹರಿಸುವುದು ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಇಲ್ಲದೆ PCR ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ನಡೆಸಬಹುದೇ ಎಂಬುದು ಬಹುತೇಕ ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಸಂಶೋಧಕರು ಮತ್ತು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಸಿಬ್ಬಂದಿಗಳ ಚಿಂತನೆಯಾಗಿದೆ.
ಫೋರ್ಜೀನ್ ಪರಿಹಾರ
ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಸಂಬಂಧಿತ ಕಿಟ್‌ಗಳ ಮೇಲೆ ವರ್ಷಗಳ ಶ್ರಮದಾಯಕ ಸಂಶೋಧನೆಯ ನಂತರ, ಫೋರ್ಜೀನ್ ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ಅನೇಕ ಅಡಚಣೆಗಳನ್ನು ಭೇದಿಸಿ ಮತ್ತು ಬಲವಾದ ಪ್ರತಿರೋಧ ಮತ್ತು ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಅನೇಕ ವಿಧದ ವಿವಿಧ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ನೇರ ಪಿಸಿಆರ್ ಅನ್ನು ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ಸಾಧಿಸಿತು, ಇದು ಸಂಶೋಧಕರಿಗೆ ತೊಡಕಿನ ಮತ್ತು ಅಪಾಯಕಾರಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ.ಇದು ಪ್ರತಿಯೊಬ್ಬರ ಶ್ರಮದ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಬಹಳವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಪ್ರಯೋಗ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ವೇಗಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಾ ವೆಚ್ಚವನ್ನು ಉಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಡೈರೆಕ್ಟ್‌ಪಿಸಿಆರ್‌ನ ಫೋರ್ಜೀನ್‌ನ ತಿಳುವಳಿಕೆ ಮತ್ತು ಜ್ಞಾನ
ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, ಡೈರೆಕ್ಟ್‌ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವು ವಿವಿಧ ಜೈವಿಕ ಮಾದರಿ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗೆ ನೇರ ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವಾಗಿದೆ.ಈ ತಾಂತ್ರಿಕ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ವಸ್ತುವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಾಗಿ ಗುರಿ ಜೀನ್ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, ಡೈರೆಕ್ಟ್‌ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ ಮಾತ್ರವಲ್ಲ, ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ.
ಮೂರನೆಯದಾಗಿ, ಡೈರೆಕ್ಟ್‌ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವು ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಗಳ ಮೇಲೆ ದಿನನಿತ್ಯದ ಗುಣಾತ್ಮಕ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ನೈಜ-ಸಮಯದ qPCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಸಹ ಒಳಗೊಂಡಿದೆ, ಇದಕ್ಕೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಹಿನ್ನೆಲೆ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪವನ್ನು ವಿರೋಧಿಸಲು ಮತ್ತು ಅಂತರ್ವರ್ಧಕ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಕ್ವೆಂಚರ್‌ಗಳನ್ನು ವಿರೋಧಿಸುವ ಪ್ರಬಲ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರಬೇಕು.
ನಾಲ್ಕನೆಯದಾಗಿ, ಡೈರೆಕ್ಟ್‌ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಿಂದ ಗುರಿಯಾಗಿರುವ ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳ ಬಿಡುಗಡೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುವ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳು, ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್‌ಗಳು, ಉಪ್ಪು ಅಯಾನುಗಳು ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದಿಲ್ಲ.ಇದಕ್ಕೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಮಿಶ್ರಣವು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾದ ವಿರೋಧಿ ರಿವರ್ಸಿಬಿಲಿಟಿ ಮತ್ತು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಲು ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು.
ಐದನೆಯದಾಗಿ, ಡೈರೆಕ್ಟ್‌ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಿಂದ ಗುರಿಪಡಿಸಲಾದ ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಯಾವುದೇ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಪುಷ್ಟೀಕರಣ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಪ್ರಮಾಣವು ತುಂಬಾ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ, ಇದಕ್ಕೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಅತ್ಯಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆ ಮತ್ತು ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ.
ತೀರ್ಮಾನ
ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ಜನನದ ನಂತರ ಕಳೆದ 30 ವರ್ಷಗಳಲ್ಲಿ ಡೈರೆಕ್ಟ್‌ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವು ಪ್ರಮುಖ ತಾಂತ್ರಿಕ ಬೆಳವಣಿಗೆಗಳು ಮತ್ತು ನಾವೀನ್ಯತೆಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ.ಫೋರ್ಜೀನ್ ಈ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ಪ್ರವರ್ತಕ ಮತ್ತು ನಾವೀನ್ಯತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಮುಂದುವರಿಯುತ್ತದೆ.
ಡೈರೆಕ್ಟ್‌ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ನಿರೀಕ್ಷೆಯು ತುಂಬಾ ವಿಶಾಲವಾಗಿದೆ.ಈ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ನಿರಂತರ ಸುಧಾರಣೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಚಾರವು ಖಂಡಿತವಾಗಿ ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ತಪಾಸಣೆ ಕೆಲಸಕ್ಕೆ ವಿಧ್ವಂಸಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ತರುತ್ತದೆ.ಇದು ಪಿಸಿಆರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ ಕ್ರಾಂತಿ.
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ಫೆಬ್ರವರಿ-21-2017
