ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಒಟ್ಟು ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಕಿಟ್ ಒಟ್ಟು ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಣಿ ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಕೋಶಕ್ಕಾಗಿ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಿಟ್ಗಳು
ಕಿಟ್ ವಿವರಣೆ:
ವಿವಿಧ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತೆ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಒಟ್ಟು ಆರ್ಎನ್ಎಯನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಹೊರತೆಗೆಯಿರಿ.
ಆರ್ಎನ್ಎ ಅವನತಿಯ ಬಗ್ಗೆ ಚಿಂತಿಸಬೇಕಾಗಿಲ್ಲ.ಇಡೀ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು RNase-ಮುಕ್ತವಾಗಿದೆ
ಡಿಎನ್ಎ-ಕ್ಲೀನಿಂಗ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಡಿಎನ್ಎ ತೆಗೆದುಹಾಕಿ
DNase ಅನ್ನು ಸೇರಿಸದೆಯೇ DNA ತೆಗೆದುಹಾಕಿ
ಸರಳ - ಎಲ್ಲಾ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಳು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ
ವೇಗವಾಗಿ - ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು 30 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಬಹುದು
ಸುರಕ್ಷಿತ-ಯಾವುದೇ ಸಾವಯವ ಕಾರಕವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ
ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತೆ-OD260/280≈1.8-2.1
ಕಿಟ್ ವಿವರಣೆಗಳು
50 ಸಿದ್ಧತೆಗಳು, 200 ಸಿದ್ಧತೆಗಳು
ಈ ಕಿಟ್ ಬಳಸುತ್ತದೆಸ್ಪಿನ್ ಕಾಲಮ್ ಮತ್ತು ಸೂತ್ರನಮ್ಮ ಕಂಪನಿಯು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದೆ, ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ ದಕ್ಷತೆಯೊಂದಿಗೆ ವಿವಿಧ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿನ-ಶುದ್ಧತೆ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ-ಗುಣಮಟ್ಟದ ಒಟ್ಟು ಆರ್ಎನ್ಎಯನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಬಹುದು. ಇದು ಸಮರ್ಥವಾದ ಡಿಎನ್ಎ-ಕ್ಲೀನಿಂಗ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್ ಮತ್ತು ಟಿಶ್ಯೂ ಲೈಸೇಟ್‌ನಿಂದ ಸುಲಭವಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು, ಸರಳ ಮತ್ತು ಸಮಯ ಉಳಿತಾಯ;ಆರ್ಎನ್ಎ-ಮಾತ್ರ ಅಂಕಣವು ಆರ್ಎನ್ಎಯನ್ನು ಸಮರ್ಥವಾಗಿ ಬಂಧಿಸಬಲ್ಲದು ಮತ್ತು ಅನೇಕ ಮಾದರಿಗಳ ವಿಶಿಷ್ಟ ಸೂತ್ರದೊಂದಿಗೆ ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೊಳಿಸಬಹುದು.
ಇಡೀ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು RNase-ಮುಕ್ತವಾಗಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ RNA ಕ್ಷೀಣಿಸುವುದಿಲ್ಲ;ಬಫರ್ ಆರ್‌ಡಬ್ಲ್ಯೂ1, ಬಫರ್ ಆರ್‌ಡಬ್ಲ್ಯೂ 2 ಬಫರ್ ವಾಷಿಂಗ್ ಸಿಸ್ಟಮ್, ಇದರಿಂದ ಪಡೆದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೋಟೀನ್, ಡಿಎನ್ಎ, ಅಯಾನ್ ಮತ್ತು ಸಾವಯವ ಸಂಯುಕ್ತ ಮಾಲಿನ್ಯದಿಂದ ಮುಕ್ತವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
ಕಿಟ್ ಘಟಕಗಳು
| ಅನಿಮಲ್ ಟೋಟಲ್ ಆರ್ಎನ್ಎ ಐಸೋಲೇಶನ್ ಕಿಟ್ | ||
| ಕಿಟ್ ಘಟಕಗಳು | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 ಟಿ | 200 ಟಿ | |
| ಬಫರ್ RL1* | 25 ಮಿಲಿ | 100 ಮಿಲಿ |
| ಬಫರ್ RL2 | 15ಮಿ.ಲೀ | 60 ಮಿಲಿ |
| ಬಫರ್ RW1* | 25 ಮಿಲಿ | 100 ಮಿಲಿ |
| ಬಫರ್ RW2 | 24 ಮಿಲಿ | 96 ಮಿಲಿ |
| RNase-ಮುಕ್ತ ddH2O | 10ಮಿ.ಲೀ | 40 ಮಿಲಿ |
| ಆರ್ಎನ್ಎ-ಮಾತ್ರ ಕಾಲಮ್ | 50 | 200 |
| ಡಿಎನ್ಎ-ಕ್ಲೀನಿಂಗ್ ಕಾಲಮ್ | 50 | 200 |
| ಸೂಚನಾ ಕೈಪಿಡಿ | 1 ತುಣುಕು | 1 ತುಣುಕು |
ಉತ್ಪನ್ನ ಮಾಹಿತಿ
| ಫಾರ್ಮ್ಯಾಟ್ | ಸ್ಪಿನ್ ಕಾಲಮ್ | ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಘಟಕ | ಫೋರ್ಜೀನ್ ಕಾಲಮ್, ಕಾರಕ |
| ಫ್ಲಕ್ಸ್ | 1-24 ಮಾದರಿಗಳು | ಪ್ರತಿ ತಯಾರಿಗೆ ಸಮಯ | ~30 ನಿಮಿಷ (24 ಮಾದರಿಗಳು) |
| ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ | ಡೆಸ್ಕ್ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ | ಪೈರೋಲಿಸಿಸ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ | ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ |
| ಮಾದರಿ | ಪ್ರಾಣಿ ಅಂಗಾಂಶ;ಜೀವಕೋಶ | ಮಾದರಿಗಳ ಮೊತ್ತ | ಅಂಗಾಂಶ: 10-20 ಮಿಗ್ರಾಂ;ಕೋಶ:(1-5)×106 |
| ಎಲುಷನ್ ಪರಿಮಾಣ | 50-200 μL | ಗರಿಷ್ಠ ಲೋಡಿಂಗ್ ಪರಿಮಾಣ | 850 μL |
ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳು ಮತ್ತು ಅನುಕೂಲಗಳು
■ ಆರ್ಎನ್ಎ ಅವನತಿ ಬಗ್ಗೆ ಚಿಂತಿಸಬೇಕಾಗಿಲ್ಲ;ಇಡೀ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು RNase-ಮುಕ್ತವಾಗಿದೆ
■ ಡಿಎನ್ಎ ಬಳಸಿ ಡಿಎನ್ಎ-ಕ್ಲೀನಿಂಗ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಿ
■ DNase ಅನ್ನು ಸೇರಿಸದೆಯೇ DNA ತೆಗೆದುಹಾಕಿ
■ ಸರಳ-ಎಲ್ಲಾ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಳು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ
■ ವೇಗದ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು 30 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಬಹುದು
■ ಸುರಕ್ಷಿತ-ಯಾವುದೇ ಸಾವಯವ ಕಾರಕ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ
■ ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತೆ -OD260/280≈1.8-2.1
ಕಿಟ್ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್
ವಿವಿಧ ತಾಜಾ ಅಥವಾ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿದ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಅಥವಾ ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಕೋಶಗಳಿಂದ ಒಟ್ಟು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕೆ ಇದು ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.
ಉತ್ಪನ್ನ ನಿಯತಾಂಕಗಳು
■ ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು: ಫಸ್ಟ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ cDNA ಸಿಂಥೆಸಿಸ್, RT-PCR, ಆಣ್ವಿಕ ಕ್ಲೋನಿಂಗ್, ನಾರ್ದರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್, ಇತ್ಯಾದಿ.
■ ಮಾದರಿಗಳು: ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳು, ಬೆಳೆಸಿದ ಜೀವಕೋಶಗಳು
■ ಡೋಸೇಜ್: ಅಂಗಾಂಶಗಳು 10-20mg, ಜೀವಕೋಶಗಳು(2-5)×106
■ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾಲಮ್ನ ಗರಿಷ್ಠ ಡಿಎನ್ಎ ಬಂಧಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ: 80 μg
■ ಎಲುಷನ್ ಪರಿಮಾಣ: 50-200 μl
ರೇಖಾಚಿತ್ರ
ಅನಿಮಲ್ ಟೋಟಲ್ ಆರ್ಎನ್ಎ ಐಸೋಲೇಶನ್ ಕಿಟ್ 20 ಮಿಗ್ರಾಂ ಚಿಕಿತ್ಸೆ
ತಾಜಾ ಮೌಸ್ ಮಾದರಿಗಳು, 5% ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಒಟ್ಟು RNA 1% ಅಗರ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ
ಗ್ಲೈಕೋಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್
1: ಗುಲ್ಮ 2: ಮೂತ್ರಪಿಂಡ
3: ಯಕೃತ್ತು 4: ಹೃದಯ
ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ಶೆಲ್ಫ್ ಜೀವನ
ಕಿಟ್ ಅನ್ನು 24 ತಿಂಗಳುಗಳವರೆಗೆ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ (15-25 ℃) ಅಥವಾ 2-8 ℃ ದೀರ್ಘಕಾಲ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.β- ಮರ್ಕಾಪ್ಟೊಎಥೆನಾಲ್ (ಐಚ್ಛಿಕ) ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ ಬಫರ್ RL1 ಅನ್ನು 1 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ 4 ℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.
ಉಲ್ಲೇಖಿಸಿದ ಲೇಖನಗಳು
1.IF:18.808:ಝೆಂಗ್, ಕ್ಯೂ., ಕ್ವಿನ್, ಎಫ್., ಲುವೋ, ಆರ್., ಮತ್ತು ಇತರರು.ಕೇಂದ್ರ ಸಂಯೋಜಿತ ವಿನ್ಯಾಸದ ಆಪ್ಟಿಮೈಸೇಶನ್ ಮೂಲಕ ಲಿವರ್ ಬೇಸ್ ಎಡಿಟಿಂಗ್‌ಗಾಗಿ mRNA-ಲೋಡ್ ಮಾಡಿದ ಲಿಪಿಡ್-ಲೈಕ್ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್.ಅಡ್ವ.ಕಾರ್ಯ.ಮೇಟರ್.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF:18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಸ್ಟೆಮ್ ಸೆಲ್ ತಯಾರಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸ್ವಾಭಾವಿಕ ಅಪೊಪ್ಟೋಸಿಸ್ ಫಾಸ್ಫಾಟಿಡೈಲ್ಸೆರಿನ್ ಬಿಡುಗಡೆಯ ಮೂಲಕ ಇಮ್ಯುನೊಮಾಡ್ಯುಲೇಟರಿ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಬೀರುತ್ತದೆ.ಸಿಗ್ನಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಟ್ ಟಾರ್ಗೆಟ್ ದೆರ್.2021 ಜುಲೈ 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF:17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.N7-Methylguanosine tRNA ಮಾರ್ಪಾಡು ಆಂಕೊಜೆನಿಕ್ mRNA ಅನುವಾದವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇಂಟ್ರಾಹೆಪಾಟಿಕ್ ಕೊಲಾಂಜಿಯೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಪ್ರಗತಿಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ.ಮೋಲ್ ಸೆಲ್.2021 ಜುಲೈ 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF:9.225:ಕಾವೊ ಎಕ್ಸ್, ಶು ವೈ, ಚೆನ್ ವೈ, ಮತ್ತು ಇತರರು.Mettl14-ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ m6A ಮಾರ್ಪಾಡು ಎಂಡೋಪ್ಲಾಸ್ಮಿಕ್ ರೆಟಿಕ್ಯುಲಮ್ ಹೋಮಿಯೋಸ್ಟಾಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುವ ಮೂಲಕ ಯಕೃತ್ತಿನ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಸುಗಮಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.ಕೋಶ ಮೋಲ್ ಗ್ಯಾಸ್ಟ್ರೋಎಂಟರಾಲ್ ಹೆಪಟೋಲ್.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಕಿಟ್ಗಳು ಇತರ ಮಾದರಿ ಮೂಲಗಳುಸಿಗುತ್ತವೆ:
ಜೀವಕೋಶ, ಸಸ್ಯ, ವೈರಲ್, ರಕ್ತ, ಇತ್ಯಾದಿ.
ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವುದಿಲ್ಲ ಅಥವಾ ಆರ್ಎನ್ಎ ಇಳುವರಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ
ಚೇತರಿಕೆಯ ದಕ್ಷತೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ವಿವಿಧ ಅಂಶಗಳಿವೆ, ಅವುಗಳೆಂದರೆ: ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿ ಆರ್ಎನ್ಎ ವಿಷಯ, ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ವಿಧಾನ, ಎಲುಷನ್ ಪರಿಮಾಣ, ಇತ್ಯಾದಿ.
1. ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಐಸ್ ಸ್ನಾನ ಅಥವಾ ಕ್ರಯೋಜೆನಿಕ್ (4 °C) ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು.
ಶಿಫಾರಸು: ಇಡೀ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ (15-25 ° C) ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿ, ಕಡಿಮೆ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಐಸ್ ಸ್ನಾನ ಮತ್ತು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಬೇಡಿ.
2. ಅಸಮರ್ಪಕ ಮಾದರಿ ಸಂರಕ್ಷಣೆ ಅಥವಾ ಅತಿಯಾದ ಮಾದರಿ ಸಂಗ್ರಹ ಸಮಯ.
ಶಿಫಾರಸು: -80 °C ನಲ್ಲಿ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ ಅಥವಾ ದ್ರವ ಸಾರಜನಕದಲ್ಲಿ ಫ್ರೀಜ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫ್ರೀಜ್-ಲೇಪ ಬಳಕೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ;ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ತಾಜಾ ಅಂಗಾಂಶ ಅಥವಾ ಕಲ್ಚರ್ಡ್ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಬಳಸಲು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿ.
3. ಸಾಕಷ್ಟಿಲ್ಲದ ಮಾದರಿ ಲೈಸಿಸ್.
ಶಿಫಾರಸು: ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಏಕರೂಪಗೊಳಿಸುವಾಗ, ಅಂಗಾಂಶವು ಸಾಕಷ್ಟು ಏಕರೂಪವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎ ಬಿಡುಗಡೆಯನ್ನು ವಿವರಿಸಲು ಅಂಗಾಂಶ ಕೋಶಗಳು ಸಾಕಷ್ಟು ವಿಭಜಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ.
4. ಎಲುವೆಂಟ್ ಅನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಸೇರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ.
ಶಿಫಾರಸು: RNase-Free ddH ಎಂದು ದೃಢೀಕರಿಸಿ2O ಅನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾಲಮ್ ಮೆಂಬರೇನ್‌ನ ಮಧ್ಯಕ್ಕೆ ಡ್ರಾಪ್‌ವೈಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
5. ಸಂಪೂರ್ಣ ಎಥೆನಾಲ್ನ ಸರಿಯಾದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಬಫರ್ RL2 ಅಥವಾ ಬಫರ್ RW2 ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ.
ಶಿಫಾರಸು: ಸೂಚನೆಗಳನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ, ಬಫರ್ RL2 ಮತ್ತು ಬಫರ್ RW2 ಗೆ ಸಂಪೂರ್ಣ ಎಥೆನಾಲ್ನ ಸರಿಯಾದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೊದಲು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.
6. ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿ ಡೋಸೇಜ್ ಸೂಕ್ತವಲ್ಲ.
ಶಿಫಾರಸು: 10-20 ಮಿಗ್ರಾಂ ಅಂಗಾಂಶ ಅಥವಾ (1-5) × 10 ಬಳಸಿ6500 μl ಬಫರ್ RL1 ಪ್ರತಿ ಜೀವಕೋಶಗಳು, ಅತಿಯಾದ ಅಂಗಾಂಶದ ಬಳಕೆಯು ಕಡಿಮೆ RNA ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು.
7. ಅಸಮರ್ಪಕ ಎಲುಷನ್ ವಾಲ್ಯೂಮ್ ಅಥವಾ ಅಪೂರ್ಣ ಎಲುಷನ್.
ಶಿಫಾರಸು: ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾಲಮ್ನ ಎಲುಷನ್ ಪರಿಮಾಣವು 50-200 μl ಆಗಿದೆ;ಎಲುಷನ್ ಪರಿಣಾಮವು ತೃಪ್ತಿಕರವಾಗಿಲ್ಲದಿದ್ದರೆ, ಪೂರ್ವಭಾವಿಯಾಗಿ ಕಾಯಿಸಲ್ಪಟ್ಟ RNase-ಮುಕ್ತ ddH ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದ ನಿಯೋಜನೆ ಸಮಯವನ್ನು ವಿಸ್ತರಿಸಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ2O, ಉದಾ 5-10 ನಿಮಿಷಗಳವರೆಗೆ.
8.ಬಫರ್ RW2 ವಾಶ್ ನಂತರ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾಲಮ್ ಎಥೆನಾಲ್ ಶೇಷವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.
ಶಿಫಾರಸು: ಬಫರ್ RW2 ತೊಳೆಯುವ ನಂತರ ಎಥೆನಾಲ್ ಅವಶೇಷಗಳಿದ್ದರೆ, 1 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಖಾಲಿ ಟ್ಯೂಬ್ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ, ಖಾಲಿ ಟ್ಯೂಬ್ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಸಮಯವನ್ನು 2 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಹೆಚ್ಚಿಸಬಹುದು ಅಥವಾ ಉಳಿದಿರುವ ಎಥೆನಾಲ್ ಅನ್ನು ಸಮರ್ಪಕವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಲು 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಇರಿಸಬಹುದು.
ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಕ್ಷೀಣಿಸುತ್ತದೆ
ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ RNA ಯ ಗುಣಮಟ್ಟವು ಮಾದರಿಯ ಸಂರಕ್ಷಣೆ, RNase ಮಾಲಿನ್ಯ ಮತ್ತು ಕುಶಲತೆಯಂತಹ ಅಂಶಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ.
1. ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಮಯಕ್ಕೆ ಇಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ.
ಶಿಫಾರಸು: ಸಂಗ್ರಹಣೆಯ ನಂತರ ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಗಳು ಅಥವಾ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಸಕಾಲಿಕವಾಗಿ ಬಳಸದಿದ್ದರೆ, ತಕ್ಷಣವೇ -80 °C ಅಥವಾ ದ್ರವ ಸಾರಜನಕದಲ್ಲಿ ಕ್ರಯೋಪ್ರೆಸರ್ವ್ ಮಾಡಿ.ಆರ್ಎನ್ಎಯನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು, ಸಾಧ್ಯವಾದಾಗಲೆಲ್ಲಾ ಹೊಸದಾಗಿ ತೆಗೆದ ಅಂಗಾಂಶ ಅಥವಾ ಜೀವಕೋಶದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಬಳಸಿ.
2. ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಗಳ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫ್ರೀಜ್-ಕರಗಿಸುವಿಕೆ.
ಶಿಫಾರಸು: ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸುವಾಗ, ಅವುಗಳನ್ನು ಸಂರಕ್ಷಣೆಗಾಗಿ ಸಣ್ಣ ತುಂಡುಗಳಾಗಿ ಕತ್ತರಿಸುವುದು ಉತ್ತಮ, ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫ್ರೀಜ್-ಕರಗುವಿಕೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎ ಅವನತಿಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಅವುಗಳನ್ನು ಬಳಸುವಾಗ ತುಂಡುಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದು ಉತ್ತಮ.
3. ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ RNase ಅನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸಲಾಗಿದೆ ಅಥವಾ ಬಿಸಾಡಬಹುದಾದ ಕೈಗವಸುಗಳು, ಮುಖವಾಡಗಳು ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ಧರಿಸುವುದಿಲ್ಲ.
ಶಿಫಾರಸು: ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಆರ್ಎನ್ಎ ಕುಶಲ ಕೊಠಡಿಗಳಲ್ಲಿ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಯೋಗದ ಮೊದಲು ಟೇಬಲ್ ಅನ್ನು ತೆರವುಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
RNase ನ ಪರಿಚಯದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ RNA ಅವನತಿಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಪ್ರಯೋಗದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಬಿಸಾಡಬಹುದಾದ ಕೈಗವಸುಗಳು ಮತ್ತು ಮುಖವಾಡಗಳನ್ನು ಧರಿಸಿ.
4. ಬಳಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ RNase ನೊಂದಿಗೆ ಕಾರಕಗಳು ಕಲುಷಿತಗೊಂಡಿವೆ.
ಶಿಫಾರಸು: ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗಾಗಿ ಹೊಸ ಅನಿಮಲ್ ಟೋಟಲ್ ಆರ್ಎನ್ಎ ಐಸೋಲೇಶನ್ ಕಿಟ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸಿ.
5. ಆರ್ಎನ್ಎ ಕುಶಲತೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಸಲಹೆಗಳು, ಇತ್ಯಾದಿಗಳು RNase ನೊಂದಿಗೆ ಕಲುಷಿತಗೊಂಡಿವೆ.
ಶಿಫಾರಸು: ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಟಿಪ್ಸ್, ಪೈಪೆಟ್‌ಗಳು ಇತ್ಯಾದಿಗಳು ಎಲ್ಲಾ ಆರ್ನೇಸ್-ಫ್ರೀ ಎಂದು ದೃಢೀಕರಿಸಿ.
ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಕೆಳಮಟ್ಟದ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ
ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾಲಮ್‌ನಿಂದ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಆರ್ಎನ್ಎ, ಉಪ್ಪು ಅಯಾನುಗಳು ತುಂಬಾ ದೊಡ್ಡದಾಗಿದ್ದರೆ, ಪ್ರೊಟೀನ್ ಅಂಶವು ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಪ್ರಯೋಗದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ: ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಶನ್, ನಾರ್ದರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ ಮತ್ತು ಇತರರು.
1. ಎಲುಷನ್ಡ್ ಆರ್ಎನ್ಎ ಉಪ್ಪು ಅಯಾನು ಶೇಷಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.
ಶಿಫಾರಸು: ಎಥೆನಾಲ್ನ ಸರಿಯಾದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಬಫರ್ RW2 ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ದೃಢೀಕರಿಸಿ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗೆ ಸೂಚಿಸಲಾದ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ವೇಗದಲ್ಲಿ 2 ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾಲಮ್ ತೊಳೆಯುವಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿ;ಯಾವುದೇ ಉಪ್ಪು ಅಯಾನು ಶೇಷ ಇದ್ದರೆ, ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಫರ್ RW2 ಗೆ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬಿಡಿ ಮತ್ತು ಉಪ್ಪಿನ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ಗರಿಷ್ಠಗೊಳಿಸಲು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಿ.
2. ಎಲುಷನ್ಡ್ ಆರ್ಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ ಎಥೆನಾಲ್ ಶೇಷ.
ಶಿಫಾರಸು: ಬಫರ್ RW2 ತೊಳೆಯುವ ನಂತರ, ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗೆ ಸೂಚಿಸಲಾದ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ವೇಗದಲ್ಲಿ ಖಾಲಿ ಟ್ಯೂಬ್ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿ, ಇನ್ನೂ ಎಥೆನಾಲ್ ಅವಶೇಷಗಳಿದ್ದರೆ ಖಾಲಿ ಟ್ಯೂಬ್ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಸಮಯವನ್ನು 2 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಅಥವಾ 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕೊಠಡಿ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಬಿಡಿ.
