ಎಂಡೋಫ್ರೀ ಮ್ಯಾಕ್ಸಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಕಿಟ್ (ಸ್ಪಿನ್ ಕಾಲಮ್)
ವಿವರಣೆ
ಎಂಡೋಫ್ರೀ ಮ್ಯಾಕ್ಸಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಕಿಟ್ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಂಧಿಸಲು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಸಿಲಿಕಾ ಮೆಂಬರೇನ್ ಆಡ್ಸೋರ್ಪ್ಶನ್ ತಂತ್ರವನ್ನು ಅಳವಡಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ.ವಿಶೇಷ ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್ ರಿಮೂವಲ್ ಬಫರ್ P4 ಮತ್ತು ಎಂಡೋಫ್ರೀ ಮ್ಯಾಕ್ಸಿ ಫಿಲ್ಟರೇಶನ್ ಕಾಲಮ್ಗಳನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್, ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದು.ಸಂಪೂರ್ಣ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಕೇವಲ 1 ಗಂಟೆ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಅನುಕೂಲಕರ ಮತ್ತು ತ್ವರಿತ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸುತ್ತದೆ.
ಪ್ರತಿ ಅಭ್ಯಾಸಕ್ಕೆ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾದ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಪ್ರಮಾಣ: ಹೈ-ಕಾಪಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಾಗಿ, 100 ಮಿಲಿ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಕಲ್ಚರ್ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಬಳಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇಳುವರಿಯು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 500-1500 μg ಆಗಿರುತ್ತದೆ.ಕಡಿಮೆ-ನಕಲು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಾಗಿ, ಸುಮಾರು 200-600 μg ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು 200 ಮಿಲಿ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
ಕಿಟ್ ಘಟಕಗಳು
ಉತ್ಪನ್ನ ಘಟಕಗಳು | D909-E(10 ಸಿದ್ಧತೆಗಳು) |
ಬಫರ್ BL | 30 ಮಿ.ಲೀ |
ಬಫರ್ P1 | 100 ಮಿ.ಲೀ |
ಬಫರ್ P2 | 100 ಮಿ.ಲೀ |
ಬಫರ್ P4 | 100 ಮಿ.ಲೀ |
ಬಫರ್ DW2 | 44 ಮಿ.ಲೀ |
ಬಫರ್ ಇಬಿ | 30 ಮಿ.ಲೀ |
RNase A (10 mg/ml) | 1 ಮಿ.ಲೀ |
DNAPure Maxi ಸ್ಪಿನ್ ಕಾಲಮ್ಗಳು | 10 ಪಿಸಿಗಳು |
ಫೈನ್ಪ್ಯೂರ್ ಮ್ಯಾಕ್ಸಿ ಫಿಲ್ಟರ್ ಸಿರಿಂಜ್ | 10 ಪಿಸಿಗಳು |
50 ಮಿಲಿ ಸಂಗ್ರಹ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು | 10 ಪಿಸಿಗಳು |
ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ DNA ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧತೆಯ ಪತ್ತೆ
ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ DNA ಯ ಶುದ್ಧತೆ ಮತ್ತು ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಮತ್ತು ನೇರಳಾತೀತ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೋಮೀಟರ್ ಮೂಲಕ ಕಂಡುಹಿಡಿಯಬಹುದು.1 ರ OD260 ಮೌಲ್ಯವು ಡಬಲ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ DNA ಯ ಸರಿಸುಮಾರು 50 μg/ml ಗೆ ಅನುರೂಪವಾಗಿದೆ.ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ DNA ಯ OD260/OD280 ಮೌಲ್ಯವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 1.7-1.9 ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿರುತ್ತದೆ.ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಸೆಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫೆಕ್ಷನ್ ಅಥವಾ ವಿವೋ ಪ್ರಯೋಗಗಳಂತಹ ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತೆಯ ಅಗತ್ಯತೆಗಳ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ನೇರವಾಗಿ ಅನ್ವಯಿಸಬಹುದು.
ಕಿಟ್ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್
ಈ ಕಿಟ್ನಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಎಂಜೈಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ, ಪಿಸಿಆರ್, ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್, ಲಿಗೇಶನ್, ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫಾರ್ಮೇಷನ್ ಮತ್ತು ವಿವಿಧ ಕೋಶ ಪ್ರಕಾರಗಳಿಗೆ ವರ್ಗಾವಣೆ ಸೇರಿದಂತೆ ವಿವಿಧ ದಿನನಿತ್ಯದ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಳಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸಬಹುದು.
ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ಶೆಲ್ಫ್ ಜೀವನ
ಎಂಡೋಫ್ರೀ ಮ್ಯಾಕ್ಸಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ (15-25 ° C) ಒಣ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ 12 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.ಮೊದಲ ಬಳಕೆಯ ಮೊದಲು RNase A ಅನ್ನು ಬಫರ್ P1 ಗೆ ಸೇರಿಸಿ, ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 2-8 ° C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 6 ತಿಂಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಕಾಲ ಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.