ನೇರ RT-qPCR ಕಿಟ್ III
ಕಿಟ್ ವಿವರಣೆ:
◮ಡೈರೆಕ್ಟ್ RT-qPCR ಕಿಟ್, ಫೊರೆಸಿ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಮತ್ತು ಫೊರೆಜಿನ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವ ಫೋರೆಸಿ ಎಚ್ಎಸ್ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ವಿಶಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ, ಈ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಬಲವಾದ ಪ್ರತಿರೋಧ ಮತ್ತು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನಂತೆ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಬಳಕೆಯ ಫೋರ್ಜೀನ್ ಲೈಸಿಸ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಅನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಬಹುದು.ಈ ಕಿಟ್ COVID-19 ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ ಮತ್ತು ಇತರ ರೋಗಕಾರಕ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸಬಹುದು.
ವಿವರಣೆ
ಡೈರೆಕ್ಟ್ RT-qPCR ಕಿಟ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾದ RT-qPCR ಬಫರ್ (ಫೊರೆಸಿ HS Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಮಿಶ್ರಿತ) ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆಫೊರೆಸಿ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ (MMLV),ಸರಳ ಪರಿಶೀಲನೆಯೊಳಗೆ ಬ್ಯಾಕ್-ಎಂಡ್ ಕಿಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಸಿಸ್ಟಮ್ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಗಳನ್ನು ರಚಿಸಲು ಇದು ಅನುಕೂಲಕರವಾಗಿದೆ.
ಡೈರೆಕ್ಟ್ RT-qPCR ಕಿಟ್, ಫೊರೆಸಿ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಮತ್ತು ಫೊರೆಜಿನ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವ ಫೋರೆಸಿ ಎಚ್ಎಸ್ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ವಿಶಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ, ಈ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಬಲವಾದ ಪ್ರತಿರೋಧ ಮತ್ತು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನಂತೆ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಬಳಕೆಯ ಫೋರ್ಜೀನ್ ಲೈಸಿಸ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಅನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಬಹುದು.ಈ ಕಿಟ್ COVID-19 ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ ಮತ್ತು ಇತರ ರೋಗಕಾರಕ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸಬಹುದು.
ಈ ಕಿಟ್ ನೇರವಾಗಿ IVD ಉತ್ಪನ್ನದ ಅಂಶವಾಗಿರಬಹುದು, ಸುಲಭವಾಗಿ ಮತ್ತು ವೇಗವಾಗಿ ಬಳಸಿ.ಮತ್ತೆ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸದೆ, ಸುಲಭವಾದ ಪರಿಶೀಲನೆಯ ಅಗತ್ಯವಿದೆ.
ವಿಶೇಷಣಗಳು
500T, 50,000T
ಕಿಟ್ ಘಟಕಗಳು
| ಕಿಟ್ ವಿಷಯಗಳು (20 μL ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 ಟಿ | 50,000 ಟಿ | |
| ಫೋರೆಸಿ ಆರ್ಎವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್(200 U/μL) | 50 μL× 1 | 1 ಮಿ.ಲೀ× 5 |
| 2× ನೇರ qPCRಮಿಕ್ಸ್-ತಕ್ಮನ್ | 1 ಮಿಲಿ × 5 | 500 ಮಿ.ಲೀ× 1 |
| ಸೂಚನಾ | 1 | 1 |
ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಹಂತಗಳು
ಉ: ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಕಾರಕವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ
1. ತಯಾರಾದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ (ಆರ್ಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲು ಫೋರ್ಜೀನ್ ಟೋಟಲ್ ಆರ್ಎನ್ಎ ಐಸೋಲೇಶನ್ ಕಿಟ್ ಸರಣಿಯ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ) ಅಥವಾ ಮಾದರಿ ಕ್ರ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಉತ್ಪನ್ನ (ಫೋರ್ಜೀನ್ ಲೈಸಿಸ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ), ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು (10 μM) ಮತ್ತು ಇತರ ಸಂಬಂಧಿತ ಉಪಭೋಗ್ಯಗಳು, ಉಪಕರಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ.
2. 2× ಡೈರೆಕ್ಟ್ RT-qPCR ಬಫರ್, RNase-Free ddH2O ಮತ್ತು 20× ROX ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಡೈ (ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೆ) ಐಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಬಾಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಹಾಕಿ, ಇವುಗಳನ್ನು ನೈಸರ್ಗಿಕವಾಗಿ ಕರಗುವಂತೆ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.
ಬಿ: RT-qPCR ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಬಫರ್‌ನ ಅರ್ಧದಷ್ಟು ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಪಡೆಯಿರಿ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಸಿಸ್ಟಮ್‌ನ ಪರಿಮಾಣವು 20 μL ಆಗಿದ್ದರೆ, ಅದು 10 μL 2× ನೇರ RT-qPCR ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಪಡೆಯಬೇಕು). ಫಾರ್ಅನುಗುಣವಾದ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣ, ನಾವು ಅದನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತೇವೆM-MLV: 10-30 U/20 μL ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ,Taqಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್（1-2 U/20 μL ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಇದು ನಮ್ಮ ಸಲಹೆಯಾಗಿದೆ, ನೀವು ಅದನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಸರಿಹೊಂದಿಸಬೇಕು), ಆರ್ಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಬ್‌ಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಆರ್‌ನೇಸ್-ಫ್ರೀ ಡಿಡಿಹೆಚ್ ಸೇರಿಸಿ2O ನಿಂದ 20 μL.RT-qPCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತಯಾರಿಕೆಯನ್ನು ಕೆಳಗಿನ ಕೋಷ್ಟಕ 1 ಗೆ ಉಲ್ಲೇಖಿಸಬಹುದು.
ಕೋಷ್ಟಕ 1 : RT-qPCR ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸುವುದು
| ಘಟಕ | ಸಂಪುಟ | ಅಂತಿಮ ಏಕಾಗ್ರತೆ |
| 2× ನೇರ RT-qPCR ಬಫರ್ | 10 μL | 1× |
| ಫೊರೆಸಿ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ (MMLV) | 10-30 ಯು | |
| ಫೊರೆಸಿ ಎಚ್ಎಸ್ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ | 1-2 ಯು | |
| ಫಾರ್ವರ್ಡ್ ಪ್ರೈಮರ್ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ತನಿಖೆ (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ (ಆರ್ಎನ್ಎ ಅಥವಾ ಲೈಸೇಟ್) | X μL | |
| 20× ROX ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಡೈ | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| ಒಟ್ಟು ಸಂಪುಟ | 20 μL |
ಗಮನಿಸಿ: ಫಾರ್ವರ್ಡ್ ಪ್ರೈಮರ್ ಮತ್ತು ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್ ಗುರಿ ಜೀನ್‌ನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳಾಗಿವೆ.ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಮತ್ತು PCR ಮಾದರಿಗಳ ಪ್ರಕಾರ qPCR ನ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದು.ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ಅಂತಿಮ ಸಾಂದ್ರತೆಗಾಗಿ ನಾವು 400nM ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡುತ್ತೇವೆ.ದಯವಿಟ್ಟು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಿದ ಅಂತಿಮ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಪ್ರಕಾರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಬ್‌ಗಳ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಹೊಂದಿಸಿ.
1*: ವಿಭಿನ್ನ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಉಪಕರಣಗಳ ಪ್ರಕಾರ ROX ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಡೈನ ಸೂಕ್ತವಾದ ಅಂತಿಮ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ.ಸಾಮಾನ್ಯ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಉಪಕರಣಗಳ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ROX ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಡೈ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಕೆಳಗಿನ ಕೋಷ್ಟಕದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ:
| ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಉಪಕರಣಗಳು | ROX ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಡೈನ ಅಂತಿಮ ಸಾಂದ್ರತೆ |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/ಹಂತ 1,ಇತ್ಯಾದಿ | 1× (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 20 μL ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ 1μl 20×ROX ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಡೈ ಸೇರಿಸಿ) |
| ABI 7500, 7500 ಫಾಸ್ಟ್, ಸ್ಟ್ರಾಟಜೀನ್ Mx3000P, Mx3005P ಮತ್ತು Mx4000, ಇತ್ಯಾದಿ. | 0.5× (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 20 μL ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ 0.5μl 20×ROX ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಡೈ ಸೇರಿಸಿ) |
| ರೋಚೆ PCR ಉಪಕರಣ, ಬಯೋ-ರಾಡ್ PCR ಉಪಕರಣ, Eppendorf ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಉಪಕರಣ, ಇತ್ಯಾದಿ. | ROX ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಡೈ ಇಲ್ಲದೆ |
ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ಶೆಲ್ಫ್ ಜೀವನ
ಕಿಟ್ ಅನ್ನು -20 ± 5℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು.ಇದನ್ನು ತಕ್ಷಣವೇ -20 ℃ ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟಿಕ್ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು.ಸೂಕ್ತವಾದ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದರೆ ಮಾನ್ಯತೆಯ ಅವಧಿಯು 2 ವರ್ಷಗಳು.
